№ 1 (2006)

В обзоре представлены современные данные о получении и использовании стволовых клеток пуповинной крови в неонатологии.

Обзор посвящен поиску новых [негемопоэтических] стволовых и прогениторных клеточных популяций пуповинной крови человека, возможностей их выделения и терапевтического применения. Для удобства обзор разбит на несколько глав, в конце каждой из которых приводится отдельный список литературы.

Обзор посвящен поиску новых [негемопоэтических] стволовых и прогениторных клеточных популяций пуповинной крови человека, возможностей их выделения и терапевтического применения. Для удобства обзор разбит на несколько глав, в конце каждой из которых приводится отдельный список литературы.

Трансплантация клеток пуповинной крови [ПК], как альтернатива неродственной трансплантации костного мозга [ТКМ], уже прочно заняла свои позиции в онкогематологии. К основным преимуществам трансплантации ПК, по сравнению с ТКМ, относят более низкую частоту развития «реакции трансплантат-против-хозяина» [РТПХ] и более либеральный подход к степени HLA-совместимости трансплантата при равном посттрансплантационном прогнозе, однако, при трансплантации ПК отмечают более низкий engraftment и повышенную вероятность рецидива [1,2].

Целью данного исследования явилась разработка способа сбора, фракционирования пуповинной крови и криоконсервирования гемопоэтических стволовых клеток. Отработан способ сбора пуповинной крови в строенный контейнер Fenwal, Baxter. Разработана методика фракционирования пуповинной крови с использованием полиглюкина. Отработана методика криоконсервирования гемопоэтических стволовых клеток с использованием 5% раствора ДМСО в сочетании с полиглюкином и замораживании в парах жидкого азота при постоянной скорости охлаждения. Создана и протестирована компьютерная база данных для хранения информации об образцах пуповинной крови. Разработанные методики могут быть успешно применены для заготовки, длительного хранения гемопоэтических стволовых клеток пуповинной крови с последующей трансплантацией больным, страдающим онкологическими заболеваниями.

Последние два десятилетия в биологии и медицине ознаменовались повышенным интересом к изучению стволовых клеток организма человека: выращивание [культивирование] их in vitro, определение способности их к делению и специализации, применение в клинической медицине для лечения некоторых фатальных заболеваний, таких, как солидные опухоли, острые и хронические лейкозы, апластическая анемия, наследственные нарушения метаболизма и иммунной системы, аутоиммунные заболевания, сахарный диабет, инсульты, травмы спинного мозга, патология миокарда и другие. Источником стволовых клеток могут быть костный мозг, стимулированные периферические гемопоэтические клетки, жировая ткань, эпителиальные клетки слизистой оболочки носоглотки в области «обонятельного эпителия», плацентарная [пуповинная] кровь, плацента. Получение стволовых клеток из первых четырех источников несколько затруднительно из-за необходимости оперативного вмешательства и использования анестезии. Пуповинная кровь [ПК] собирается без риска для новорожденного и его матери. Поэтому в статье мы хотим подробно остановиться на одном из этапов доклинического использования плацентарной крови, поделиться своим опытом по заготовке, лабораторному тестированию и хранению стволовых клеток.

Цель исследования - провести анализ лабораторного скрининга на наличие инфекционных агентов при заготовке пуповинной крови для публичного использования. Мы исследовали 586 донорских образцов ПК методом иммуно- ферментного анализа в первые 24 часа после родов на наличие следующих серологических маркеров: НІѴ-1 и-2 Ag/Ab, Anti-HBcor, HBs-Ag, Anti-HCV, Anti-CMV, Anti-Toxoplasma gondii, Anti-HSV-1 и -2, RW, также проводилось бактериологическое исследование образцов ПК. Установлено, что 73 [12,5%] образца ПК утилизированы по причине инфекционной опасности. Из них положительный анализ на HBs-Ag выявлен в 3 образцах [0,5%]; Anti-HCV- в 5 образцах [0,9%]; RW — в 6 образцах [1%]; Anti-HBcor -в 59 образцах [1О%]. Процент высеваемости микробов-контаминантов составил 0,1%. Таким образом, для уменьшения процента утилизации образцов ПК в обязательный лабораторный скрининг женщин-доноров ПК должен быть включён анализ на Anti-HBcor. Использование закрытых методик забора и обработки крови, а также готовых универсальных сред позволяет практически исключить возможность контаминации образцов ПК воздушной флорой.

За последние два десятилетия пуповинная кровь признана в качестве полноценного и равноправного источника гемопоэтических стволовых клеток наряду с костным мозгом и периферической кровью. Первая трансплантация клеток пуповинной крови от сиблинга, проведенная в 1988 г. ребенку с анемией Фанкони, позволила не только расширить показания к трансплантации, но и углубила наши познания об основах гемопоэза и принципах становления посттрансплантационного иммунитета. Важным шагом явилось создание банков пуповинной крови по всему миру, что увеличило вероятность нахождения подходящего донора, и, следовательно, благоприятно сказалось на трансплантационной активности. Преимуществами клеток пуповинной крови являются относительная легкость получения, высокий пролиферативный потенциал и «наивность» иммунной системы трансплантата. Проблемами являются малый объем и низкая клеточность получаемого материала, что приводит к замедленному восстановлению показателей гемопоэза после трансплантации, существенно увеличивает длительность пребывания больного в стационаре и потребность в трансфузии препаратов крови. Делаются попытки преодолеть неблагоприятные факторы путем одновременной трансплантации мезенхимальных клеток и пуповинной крови или последовательной трансплантации нескольких образцов пуповинной крови от разных доноров. Мы представляем описание случая последовательной трансплантации гемопоэтических клеток пуповинной крови и периферических стволовых клеток от родственного частично-совместимого донора больному с нейробластомой IV стадии.

В статье представлены современные данные о состоянии службы сохранения пуповинной крови в Украине.