Analysis of laboratory screening for cord blood banking
- Authors: Tyumina O.V.1, Gusarova G.I.2, Pavlov V.V.3, Zharkov M.N.1, Volchkov S.E.1, Toropovsky A.N.1, Krasnova N.N.4, Nizhegorodtseva I.A.4, Rossiev V.A.4, Savchenko V.G.5
-
Affiliations:
- State Unitary Enterprise of the Samara region "Volga Hematopoietic Cell Bank"
- Ministry of Health of the Samara Region
- Samara State Medical University
- Samara Regional Hospital named after M.I. Kalinin
- Hematology Research Center of the Russian Academy of Medical Sciences
- Issue: No 1 (2006)
- Pages: 72-73
- Section: Original Study Articles
- Submitted: 19.01.2023
- Accepted: 19.01.2023
- Published: 06.03.2023
- URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/126652
- DOI: https://doi.org/10.23868/gc126652
- ID: 126652
Cite item
Full Text
Abstract
The purpose of the study is to analyze laboratory screening for the presence of infectious agents in the procurement of cord blood for public use. We examined 586 donor PC samples by immuno-enzyme analysis in the first 24 hours after delivery for the presence of the following serological markers: NiѴ-1 and-2 Ag/Ab, Anti-HBcor, HBS-Ag, Anti-HCV, Anti-CMV, Anti-Toxoplasma gondii, Anti-HSV-1 and -2, RW, bacteriological examination of PC samples was also carried out. It was found that 73 [12.5%] PC samples were disposed of due to infectious danger. Of these, a positive analysis for HBs-Ag was detected in 3 samples [0.5%]; Anti-HCV - in 5 samples [0.9%]; RW — in 6 samples [1%]; Anti-HBcor - in 59 samples [1O%]. The percentage of germination of microbial contaminants was 0.1%. Thus, in order to reduce the percentage of PC samples disposal, an Anti-HBcor analysis should be included in the mandatory laboratory screening of female PC donors. The use of closed methods of blood sampling and processing, as well as ready-made universal media, allows virtually eliminating the possibility of contamination of PC samples with aerial flora.
Keywords
Full Text
Лабораторный скрининг на наличие инфекционных агентов является одним из обязательных этапов исследования в технологии банкирования пуповинной крови [ПК] и подготовки образцов к клиническому использованию. История создания банков ПК началась во Франции с 1988 г. [1, 2]. Сегодня целая сеть как государственных, так и частных банков пуповинной крови [ПК] работает за рубежом. Разработан единый международный стандарт для банков ПК «International Standards for Cord Blood Collection, Processing, Testing, Banking, Selection and realease», который регламентирует все процедуры работы с образцом ПК [получение крови, тестирование, обработка, криохранение].
В России история создания банков пуповинной крови началась с 2003 г, только два банка [в Москве и Самаре], являясь государственными, осуществляют хранение образцов для публичного использования. Основным документом, регламентирующим деятельность банков ПК в РФ, является Приказ Министерства здравоохранения РФ № 325 от 25.07.2003 г. «О развитии клеточных технологий в Российской Федерации».
В настоящей статье проведён анализ результатов лабораторного скрининга, проводимого в процессе обработки ПК на наличие инфекционных агентов по материалам работы государственного банка ПК, созданного в Самаре в 2003 г.
Материал и методы
Сбор ПК производился после получения информированного согласия у беременной женщины, которая проходила тщательный дородовый скрининг на наличие противопоказаний к донорству ПК [тяжёлые соматические заболевания, отягощённый семейный анамнез, акушерская патология]. Донором не может быть беременная женщина при положительных результатах тестирования на наличие следующих инфекций: ВИЧ 1 и 2, сифилис, гепатит В и С, острая стадия следующих инфекций [положительный Ig М] - вируса простого герпеса 1 и 2, цитомегаловируса, токсоплазмоза. Информация о женщине - доноре плацентарной крови кодировалась и заносилась в анонимном виде в базу данных банка. Сбор ПК проводился как при физиологических, так и при оперативных родах закрытым способом в стандартную систему для забора донорской крови [контейнеры пластиковые одинарные CPDA-1 250 GG, Terumo],
Всего 586 образцов ПК подвергнуто обработке и криозамораживанию. Один из основных этапов в процессе обработки ПК - лабораторный скрининг ПК на наличие инфекций. В соответствии с приказом М3 РФ № 325 от 25.07.2003 г. проводилось исследование крови методом иммуноферментного анализа на аппарате «Axsym system» [Abbott] в первые 24 часа после родов на наличие следующих серологических маркеров: НІѴ-1 и -2 Ag/Ab, Anti-HBcor, HBs-Ag, Anti-HCV [тест-системы фирмы Abbott], на аппарате SANOFI Pasteur проводилось исследование на Anti-CMV, AntiToxoplasma gondii, Anti-HSV-1 и -2, RW [тест-системы ЗАО «Вектор-Бест», ЗАО «ЭКОлаб»]. Для микробиологического исследования образцов ПК использовалась универсальная среда HiCombi Dual Performance Medium производства компании HIMEDIA. Для бактериологического исследования проводился забор 5 мл плазмы, полученной в результате обработки ПК по методу Рубинштейна - двойное центрифугирование [с добавлением гидроксиэтилкрахмала [3]] или аппаратным методом с помощью сепаратора Sepax Швейцарской фирмы «Biosafe» по протоколу «UCB-HES» v.11О.
Результаты и обсуждение
Из 586 образцов ПК 73 [12,5%] было утилизировано по причине инфекционной опасности. Из них положительный анализ на HBs-Ag выявлен в 3 образцах [0,5%]; Anti-HCV - в 5 образцах [0,9%]; RW - в 6 образцах [1%]; Anti-HBcor - в 59 образцах [10%]. Высокий процент выявляемое™ антител к ядерному антигену гепатита В [10%] связан с высокой персистенцией вируса гепатита В в популяции и свидетельствует в пользу перенесённого гепатита. Данный анализ не входит в обязательный перечень обследований, как для доноров крови [4], так и беременных женщин, однако является обязательным при тестировании ПК в связи с более высокими требованиями к безопасности концентрата прогениторных клеток ПК [5].
Положительный титр антител класса IgG к СМѴ был выявлен в 528 образцах [90%], к Toxoplasma gondii - в 246 образцах [48%], к вирусу герпеса - в 550 образцах [94%], что свидетельствует о высокой встречаемости данных инфекций в популяции и не является показанием к утилизации образцов ПК.
Для микробиологического анализа исследуемых образцов крови на стерильность и грибы использовалась двухфазная готовая среда HiCombi Dual Performance Medium производства компании HIMEDIA. Спектр выявленных микроорганизмов представлен следующим образом: S. Epidermidis [0,1%], Е. Соіі [0,5%], KI. Pneumoniae [2%], S. Warneri [0,3%], S. Hominis [1%], S. Haemolyticus [0,5%], Str. Haemolyticus [0,3%), Ent. Faecalis [1%], A. Viridans [0,1%]. Общий процент высеваемости составил 5,8%. Благодаря использованию закрытого способа забора ПК, закрытых способов обработки ПК, а также готовой универсальной среды HiCombi [для исключения возможности контаминации проб воздушной флорой] процент высеваемости микробов-контаминантов [A. Viridans] составил всего 0,1%. В соответствии с международными стандартами, у выявленных микроорганизмов была определена чувствительность к антибиотикам.
Заключение
Проведенная исследовательская работа показала, что для уменьшения процента утилизации образцов ПК в обязательный лабораторный скрининг женщин-доноров ПК должен быть включён анализ на Anti-HBcor.
Использование закрытых методик забора и обработки крови, а также готовых универсальных сред позволяет практически исключить возможность контаминации образцов ПК воздушной флорой.
About the authors
O. V. Tyumina
State Unitary Enterprise of the Samara region "Volga Hematopoietic Cell Bank"
Author for correspondence.
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
G. I. Gusarova
Ministry of Health of the Samara Region
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
V. V. Pavlov
Samara State Medical University
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
M. N. Zharkov
State Unitary Enterprise of the Samara region "Volga Hematopoietic Cell Bank"
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
S. E. Volchkov
State Unitary Enterprise of the Samara region "Volga Hematopoietic Cell Bank"
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
A. N. Toropovsky
State Unitary Enterprise of the Samara region "Volga Hematopoietic Cell Bank"
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
N. N. Krasnova
Samara Regional Hospital named after M.I. Kalinin
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
I. A. Nizhegorodtseva
Samara Regional Hospital named after M.I. Kalinin
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
V. A. Rossiev
Samara Regional Hospital named after M.I. Kalinin
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Samara
V. G. Savchenko
Hematology Research Center of the Russian Academy of Medical Sciences
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation, Moscow
References
- Gluckman Е., Broxmeyer Н.Е., Auerbach A.D. et al. Hematopoietic reconstitution in a patient with Fanconis anemia by means of umbilical-cord blood from HLA-identical sibling. N. Engl. J. Med. 1989; 321:1174-8.
- Gluckman E. Hematopoietic Stem-Cell transplants using umbilical-cord blood N. Engl. J. Med. 2001; 344 [24): 1860-1.
- S.Rubinstein P., Dobrila L., Rosenfield R. E. et al. Processing and cryopreservation of placental/umbilical cord blood for unrelated bone marrow reconstitution. Proc. Nat. Acad. Soi. USA 1995; 92[22): 10119-22
- Приказ М3 РФ №364 от 14.09.01 «Об утверждении порядка медицинского обследования донора крови и её компонентов».
- Приказ М3 РФ №325 от 25.07.03 «О развитии клеточных технологий в Российской Федерации»
Supplementary files
