СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БИОЛОГИЧЕСКИХ КАРКАСОВ



Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Оценка жизнеспособности и метаболической активности клеток на каркасах является важным этапом характеристики качества децеллюляризированного матрикса и возможности его применения для создания тканеинженерных конструкций. Разнообразные методы оценки цитотоксических свойств матриксов не всегда характеризуются методологическим единством, имеется разброс показателей при использовании разных протоколов проведения исследования, что требует дальнейшего изучения. На примере рецел-люляризации децеллюляризированных матриксов легких и диафрагмы крыс изучены основные методы определения цитотоксических свойств биологических каркасов. Установлено, что описанный в зарубежной литературе колориметрический метод оценки оптической плотности исследуемых образцов и контрольных клеток (триплеты опытных и контрольных ячеек) с последующим сравнительным анализом не дает полного представления о жизнеспособности клеток на каркасах. Расчет клеточной жизнеспособности по математическим формулам представляется наиболее объективным методом оценки цитотоксических свойств биологических каркасов. Перспективным методом оценки клеточной активности на биологических каркасах является измерение флуоресцентной активности реагента Alamar Blue с последующей количественной оценкой пролиферации клеток. Колориметрический анализ поглощения данного реагента без учета флуоресценции малоинформативен, что требует разработки алгоритмов комплексной оценки жизнеспособности клеток на каркасах.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Е. В Куевда

Кубанский государственный медицинский университет

Краснодар, Россия

Е. А Губарева

Кубанский государственный медицинский университет

Краснодар, Россия

А. С Сотниченко

Кубанский государственный медицинский университет

Краснодар, Россия

И. С Гуменюк

Кубанский государственный медицинский университет

Краснодар, Россия

И. В Гилевич

Кубанский государственный медицинский университет

Краснодар, Россия

Р. З Накохов

Кубанский государственный медицинский университет

Краснодар, Россия

Список литературы

  1. Куевда Е.В., Губарева Е.А., Сотниченко А.С. и др. Перспективы создания тканеинженерных легких с использованием методов-регенеративной медицины. Гены и клетки 2015; 10(1): 35-40.
  2. Atala A. Tissue engineering, stem cells and cloning: current concepts and changing trends. Expert opinion on biological therapy 2005; 5(7): 879-92.
  3. Badylak S.F., Taylor D., Uygun K.Whole-organ tissue engineering: decellularization and recellularization of three-dimensional matrix scaffolds.Annu.Rev. Biomed.2011; 13: 27-53.
  4. Wilson G.D., McNally N.J., Dische S. et al. Measurement of cell kinetics in human tumours in vivo using bromodeoxyuridine incorporation and flow cytometry.British J. Canc. 1988; 58: 423-31.
  5. Rampersad S.N. Multiple applications of Alamar Blue as an indicator of metabolic function and cellular health in cell viability bioassays.Sensors2012;12: 12347-60.
  6. Багаева В.В., Попова В.М., Пашкова Г.С. и др. Изучение эффективности и безопасности применения антимикробных средств. Исследования и практика в медицине 2015; 2(3):35-42.
  7. JostL.M., KirkwoodJ.M., WhitesideT.L.Improved short- and long-term XTT-based colorimetric cellular cytotoxicity assay for melanoma and other tumor cells. J. Immunol. Methods 1992; 147(2): 153-65.
  8. Huyck L., Ampe C., Van Troys M. The XTT cell proliferation assay applied to cell layers embedded in three-dimensional matrix. Assay Drug Dev. Technol. 2012; 10(4): 382-92.
  9. Scudiero D.A., Shoemaker R.H., Paull K.D.et al. Evaluation of a soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drug sensitivity in culture using human and other tumor cell lines. Cancer Res. 1988; 48(17): 4827-33.
  10. Al-Nasiry S., Geusens N., Hanssens M. et al. The use of Alamar Blue assay for quantitative analysis of viability, migration and invasion of choriocarcinoma cells. Hum. Reprod. 2007; 22(5):1304-9.
  11. Schmidt J., Zyba V., Jung K. et al. Cytotoxic effects of octenidine mouth rinse on human fibroblasts and epithelial cells - an in vitro study. DrugChem. Toxicol. 2016; 39(3): 322-30.
  12. Куевда Е.В., Губарева Е.А., Сотниченко А.С. и др. Опыт перфузионной рецеллюляризации биологического каркаса легких крысы. Вестник трансплантологии и искусственных органов 2016; 18(1): 38-44.
  13. Gubareva E.A., Sjoqvist S., Gilevichl. V. et al. Orthotopic transplantation of a tissue engineered diaphragm in rats. Biomaterials 2016; 77: 320-35.
  14. General method formeasuringcytotoxicity or proliferation using alamarBlue® [Electronic source]. URL https://www.bio-rad-antibodies. com/measuring-cytotoxicity-proliferation-spectrophotometry-fluorescence-alamarBlue.htm

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Эко-Вектор, 2017



СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: 

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах