Transplantation of multi-potent mesenchymal stromal cells for the treatment of graft-versus-host reaction

Full Text

В настоящее время основным и практически безальтернативным подходом к лечению лейкоза является аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) [1, 2]. Однако высокая смертность в результате таких пересадок связана с развитием тяжелых форм реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). До сих пор не разработано достаточно эффективных протоколов лечения и профилактики острой РТПХ, резистентной к стероидным препаратам [3].

Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК), полученные из костного мозга взрослого организма, в определенных in vitro и in vivo условиях способны дифференцироваться в различные мезенхимные производные [4, 5]. Известно, что аллогенные ММСК не обладают иммуностимулирующими свойствами in vitro: они не индуцируют пролиферацию лимфоцитов в реакции смешанной культуры и не являются мишенями для действия NK-клеток [6, 7]. Кроме того, in vitro исследования демонстрируют иммуносупрессивные свойства МСК, что делает их весьма привлекательным объектом с точки зрения иммунокоррегирующей терапии аутоиммунных реакций и реакций отторжения трансплантата [8].

В журнале Transplantation опубликованы результаты I фазы клинических испытаний метода трансплантации ММСК в качестве терапии острой, резистентной к лекарственному воздействию РТПХ у больных лейкозом и солидным раком после трансплантаций ГСК или инфузий донорских лейкоцитов. Исследование проводилось группой Ringdén в Karolinska University Hospital (Швеция) под руководством Le Blanc. 2 года назад этой же группой было описано клиническое наблюдение улучшения течения острой резистентной РТПХ с кишечными и печеночными проявлениями IV стадии при введении ММСК [9].

В настоящее исследование вошли 8 пациентов с III-IV стадиями острой РТПХ и один пациент с хронической формой РТПХ. Контролем служили 16 пациентов с острой РТПХ II-IV стадий, резистентной к терапии стероидами. Четырнадцать из них не получали инфузий ММСК по причине ограниченности ресурсов лаборатории, двое отказались от лечения. ММСК выделялись в культуре из аспиратов костного мозга здоровых доноров и пересаживались на 1 -4 пассажах. Фенотипическая характеристика клеток CD166⁺/CD105⁺/ CD73⁺/CD44⁺/CD29⁺/HLA-I⁺/CD34^-/CD45^-/CD14^-.

В результате лечения 4 пациента продемонстрировали полное выздоровление, 1 - улучшение в течении заболевания, у одного развился гастроэнтерит. Два пациента умерли после введения ММСК от полиорганной недостаточности и инфекции, однако при вскрытии не было обнаружено признаков РТПХ. Выживаемость в группе, получавшей инфузии ММСК, была значительно выше, чем в контрольной. У пациента, получавшего терапию ММСК в связи с хронической РТПХ, значительного улучшения выявлено не было.

Первые пациенты получали гаплоидентичные ММСК от доноров-родственников. Однако для получения необходимого для трансплантации количества клеток, по расчетам авторов, требуется не менее четырех недель, поэтому при развитии острой реакции время для получения трансплантата может быть лимитировано. В настоящее время пациентам производятся инфузии ММСК, полученных от неродственных несовместимых доноров. Пока общее число пациентов ограничено, однако предварительные данные позволяют предположить, что полное излечение от РТПХ может быть достигнуто также и введением HLA-несовместимых ММСК. Авторы отмечают, что ответ на лечение не зависел от возраста донора или от числа пассажей клеток в культуре.

Большая часть пациентов получила ММСК, культивировавшиеся in vitro менее 30 дней. Некоторые пациенты получали повторные трансплантации ММСК. Авторы пересаживали разное количество клеток и выяснили, что наиболее эффективным является количество ММСК 2-9 млн клеток на кг массы пациента. У двух пациентов, получавших дозу ММСК ниже 2 млн/кг, наблюдались рецидивы заболевания. Тем не менее, у одного из них после повторного введения ММСК началась ремиссия.

Испытания новых методов клеточной трансплантации обычно проводятся в группах пациентов с тяжелым, не поддающимся стандартному лечению, течением заболевания с плохим прогнозом. Аналогично, в настоящее исследование были включены пациенты, страдающие тяжелыми формами острой РТПХ, тем не менее, большая их часть выжила. Более того, были отмечены случаи практически полного выздоровления, а медиана выживаемости была намного выше, чем в контрольной группе, подвергавшейся лечению без применения ММСК. Авторы отмечают и ряд недостатков в проведении исследования. В него было включено всего лишь несколько пациентов, оно не было рандомизировано и, следовательно, еще не получены неоспоримые доказательства того, что именно трансплантация ММСК приводит к позитивной иммуномодуляции in vivo, хотя иное объяснение предложить сложно. Однако, можно сделать вывод о том, что метод выполним в такой тяжелой группе пациентов и безопасен, поскольку не было отмечено побочных эффектов. Необходимы дальнейшие исследования с более жестким контролем (попытки терапии острой РТПХ с помощью ММСК и плацебо недавно были начаты в Европе).

Данное исследование может послужить основой для использования ММСК в терапии стероид-резистентной острой РТПХ. Аллогенные ММСК, полученные от родственных, от гапло-идентичных или даже от HLA-несовместимых доноров могут использоваться в качестве иммуносупрессоров при РТПХ, а также для восстановления поврежденного в результате аутоиммунных реакций кишечного эпителия.

About the authors

A. S. Grigoryan

Author for correspondence.
Email: redaktor@celltranspl.ru
Russian Federation

References

Supplementary files