СAR-опосредованная антиметастатическая активность модифицированных NK-клеток линии YT

Адоптивный перенос T- и NK-клеток, экспрессирующих химерные антигенные рецепторы (CAR), рассматривают как перспективную стратегию борьбы с онкологическими заболеваниями. Химерные антигенные рецепторы представляют собой искусственные молекулы, которые обеспечивают активацию несущих их клеток при контакте с определенным антигеном для реализации функции киллинга. В отличие от Т-клеток, NK-клетки не экспрессируют Т-клеточные рецепторы, что позволяет использовать их в аллогенном формате, не опасаясь реакции «трансплантат против хозяина». Целью данной работы было исследование антиметастатической активности дважды модифицированной человеческой NK-клеточной линии YT - клеток Cyto-CAR-YT-Lact, несущих CAR к белку PSMA и экспрессирующих проапоптотический белок лактаптин. Методом лентивирусной трансдукции была получена линия карциномы молочной железы BrCCh4e-134 с высокой экспрессией PSMA. В качестве эффекторных клеток была использована дважды модифицированная NK-клеточная линия человека YT - Cyto-CAR-YT-Lact, экспрессирующая функциональный CAR против PSMA и несущая делецию гена Shp-2, кодирующего белок Shp-2 - негативный регулятор активации NK-клеток. Цитотоксическую активность Cyto-CAR-YT-Lact-клеток in vitro оценивали на клеточной линии BrCCh4e-134 с гиперэкспрессией PSMA и на PSMA-негативной родительской клеточной линии BrCCh4e в режиме реального времени. Анализ антиметастатической активности Cyto-CAR-YT-Lact-клеток проводили на модели спонтанно метастазирующей и внутривенно трансплантированной PSMA-позитивной опухоли BrCCh4e-134 на мышах SCID и NOD/SCID. Клетки дважды модифицированной линии Cyto-CAR-YT-Lact эффективно уничтожали PSMA-позитивные опухолевые клетки-мишени и с меньшей эффективностью PSMA-негативные клетки-мишени в экспериментах in vitro. В качестве опухолевой модели в работе использовали клетки рака молочной железы человека, гиперэкспрессирующие молекулы-мишени PSMA и характеризующиеся метастазированием в лимфоузлы средостения при трансплантации мышам. Было показано, что однократное внутривенное введение препарата клеток Cyto-CAR-YT-Lact супрессировало развитие метастазов на модели спонтанного метастазирования и при введении опухолевых клеток в кровоток. Ответ первичного опухолевого узла на терапию Cyto-CAR-YT-Lact-клетками не был обнаружен. Таким образом, применение модифицированных NK-клеток можно рассматривать в качестве многообещающего терапевтического подхода для подавления метастазирования, но не для супрессии роста первичного опухолевого узла.

CAR-NK клетки, химерный антигенный рецептор, лактаптин