Оптимизация результатов трансплантации клеток в сетчатку, поврежденную лазерным излучением на модели эксплантационной культуры

Применение клеточных технологий, а именно, трансплантация нейрональных стволовых/прогениторных клеток (НСПК) и клеток пигментного эпителия (ПЭ), в современной офтальмологии дало возможность восстанавливать утраченное зрение после необратимых повреждений сетчатки. Однако полученные как в клинике, так и в эксперименте данные наблюдения за репарацией дефектов сетчатки после клеточной трансплантации часто носят противоречивый характер и не позволяют добиться желаемого результата. Остается бесспорной решающая роль нового микроокружения на судьбу трансплантированных клеток, однако наглядно продемонстрировать зависимость активности участия введенных в организм клеток от места и способа инъекции удается при сравнении экспериментов in vivo и in vitro с применением модели органотипического эксплантационного культивирования.
Нами были предложены модели трансплантации GFP+ НСПК 4-го пассажа и клеток ПЭ В-го пассажа мышей линии C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)/0sb/J в эксплан-тационную культуру сетчатки (37°С, 5%С02 DMEM/F12, + глутамин, +dFGFn EGF (10 нг/мл), В27, N2 и 10% Fetal clone) и их инъекции интравитриально (10 000 кл./2 мкл), ретробульбарно (300 000 кл./10 мкл) и супрахориоидально (300 000 кл./2 мкл) крысам линии Campbell в возрасте 14 сут. с последующим иммуногистохимическим анализом экспресии (З-Ш-тубу-лина и GFAP.