Изучение длины теломер и колониеобразующейспособности гемопоэтических стволовых клетокпуповинной крови при криоконсервировании
- Авторы: Карпова НС1, Абдулкадыров КМ1, Селиванов ЕА1, Балашова ВА1
-
Учреждения:
- Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-Петербург
- Выпуск: Том 6, № 4 (2011)
- Страницы: 42-47
- Раздел: Статьи
- Статья получена: 11.01.2023
- Статья опубликована: 15.12.2011
- URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/121671
- DOI: https://doi.org/10.23868/gc121671
- ID: 121671
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Изучен пролиферативный потенциал гемопоэтических
стволовых клеток (ГСК) пуповинной крови (ПК) в зависи-
мости от способа криоконсервирования. Определена дли-
на теломер и колониеобразующая способность (КОС) ГСК
ПК. Длина теломер измерена с использованием новейшего
метода, сочетающего проточную цитометрию и флуорес-
центную гибридизацию in situ (FISH). Исследования вы-
полнялись на проточном цитофлуориметре Cytomics FS-
500 (Beckman Coulter, Швейцария). Для флуоресцентной
гибридизации in situ использовался PNA-зонд, меченный
FITC (DAKO, Дания). КОС ГСК ПК исследовалась в полной
культуральной среде на основе метилцеллюлозы Н4435
MethoCult® (StemCellTechnologies, Канада). Криоконсер-
вирование образцов проводилось в программном замо-
раживателе Planer и парах жидкого азота. Установлена
корреляция между длиной теломер ГСК ПК и их КОС. При
сравнении сохранности пролиферативных свойств ГСК ПК
при криоконсервировании в программном замораживателе
и парах жидкого азота доказано преимущество применения
программного замораживателя для сохранения ГСК ПК.
Таким образом, для криоконсервирования образцов ГСК
ПК целесообразно использовать программный заморажи-
ватель, так как при данном способе сохранения образцов
клетки остаются жизнеспособными и функционально пол-
ноценными. Длина теломер может служить важным марке-
ром сохранности пролиферативного потенциала ГСК ПК.
стволовых клеток (ГСК) пуповинной крови (ПК) в зависи-
мости от способа криоконсервирования. Определена дли-
на теломер и колониеобразующая способность (КОС) ГСК
ПК. Длина теломер измерена с использованием новейшего
метода, сочетающего проточную цитометрию и флуорес-
центную гибридизацию in situ (FISH). Исследования вы-
полнялись на проточном цитофлуориметре Cytomics FS-
500 (Beckman Coulter, Швейцария). Для флуоресцентной
гибридизации in situ использовался PNA-зонд, меченный
FITC (DAKO, Дания). КОС ГСК ПК исследовалась в полной
культуральной среде на основе метилцеллюлозы Н4435
MethoCult® (StemCellTechnologies, Канада). Криоконсер-
вирование образцов проводилось в программном замо-
раживателе Planer и парах жидкого азота. Установлена
корреляция между длиной теломер ГСК ПК и их КОС. При
сравнении сохранности пролиферативных свойств ГСК ПК
при криоконсервировании в программном замораживателе
и парах жидкого азота доказано преимущество применения
программного замораживателя для сохранения ГСК ПК.
Таким образом, для криоконсервирования образцов ГСК
ПК целесообразно использовать программный заморажи-
ватель, так как при данном способе сохранения образцов
клетки остаются жизнеспособными и функционально пол-
ноценными. Длина теломер может служить важным марке-
ром сохранности пролиферативного потенциала ГСК ПК.
Об авторах
Н С Карпова
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-ПетербургРоссийский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-Петербург
К М Абдулкадыров
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-ПетербургРоссийский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-Петербург
Е А Селиванов
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-ПетербургРоссийский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-Петербург
В А Балашова
Российский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-ПетербургРоссийский НИИ гематологии и трансфузиологии ФМБА России, Санкт-Петербург
Список литературы
- Ballen K.K. New trends in umbilical cord blood transplantation. Blood 2005; 105(10): 3786-92.
- Абдулкадыров К.М. Заготовка, хранение и лабораторное те- стирование пуповинной крови. Гематология. Новейший справочник. М.: «Эксмо», 2004
- Абдулкадыров К.М., Романенко Н.А., Старков Н.Н. Получе- ние и клиническое применение периферических гемопоэтических стволовых клеток из пуповинной крови. Вопросы онкологии 2000; 46(5): 513-20.
- Куртова А.В., Зуева Е.Е., Фрегатова Л.М. Методы банкирова- ния пуповинной крови. Иммунология 2005: 577-91.
- Владимирская Е.Б., Майорова О.А., Румянцев С.А. и др. Био- логические основы и перспективы терапии стволовыми клетками. М: «Медпрактика-М», 2005.
- Ballen K. Cord blood banking review. Hematologist 2004.
- Румянцев А.Г., Масчан. А.А. Трансплантация гемопоэтиче- ских стволовых клеток у детей. Руководство для врачей. М.: МИА, 2003.
- Гришина В.В., Тимохина Е.В., Андреева Л.Ю. Система сбора и фракционирования стволовых клеток пуповинной крови. Вопросы гинекологии, акушерства и перинаталогии 2004; 3(6): 50-4.
- Ballen K., Barker J., Stewart S. et al. Collection and preservation of cord blood for personal use. Biol. Blood Marrow Transpl. 2008; 14: 356-63.
- Blackburn E.H. Telomeres and telomerase: their mechanisms of action and the effects of altering their functions. FEBS Lett. 2005; 579(4): 859-62.
- Pipes L., Tsang T., Peng S. et al. Harris telomere length changes after umbilical cord blood transplant. Transfusion 2006; 46: 1038-43.
- Lansdorp M. Telomeres, stem cells, and hematology. Blood 2008; 111: 1759-66.
- Notaro R., Cimmeno A., Tabarini D. In vivo telomere dynamics of human hematopoietic stem cells. PNAS USA 1997; 94: 13782-5.
- Honda S., Weigel A., Hjelmeland M. et al. Induction of telomere shortening and replicative senescence by cryopreservation. Biochem. Biophys. Research Comm. 2001; 282: 493-8
- Hunt J., Armitage E., Pegg E. Cryopreservation of umbilical cord blood: 1. Osmotically inactive volume, hydraulic conductivity and permeability of CD34. cells to dimethyl sulphoxide. Cryobiology 2003; 46: 61-75.
- Hunt J., Armitage E., Pegg E. Cryopreservation of umbilical cord blood: 2. Tolerance of CD34. cells to multimolar dimethyl sulphoxide and the effect of cooling rate on recovery after freezing and thawing. Cryobiology 2003; 46: 76-87.
- Mazur P. Freezing of living cells: Mechanisms and implications. Am. J. Physiol. 1984; 247: 125-42.
Дополнительные файлы
