Разработка органной культуры мужских гонад для вирусологических исследований

Разработка органной культуры мужских гонад является актуальной проблемой биотехнологии, которая оставалась нерешенной до последнего времени. В то же время, создание органной культуры яичка необходимо для решения как фундаментальных проблем сперматогенеза, так и задач практического здравоохранения, связанных с лечением мужского бесплодия. Одно из первых мест в этиологии бесплодия занимают инфекционные заболевания, в том числе герпесвирусные инфекции (ГВИ).
Цель настоящей работы состояла в разработке культуральной системы, позволяющей сохранять жизнеспособность мужских половых клеток in vitro и оценивать влияние вирусов герпеса на сперматогенез. Для разработки условий культивирования мужских гонад проведены опыты с семенниками мышей DBA и с фрагментами яичек человека, полученных из операционного материала от пациентов после орхэктомии. Каждые 4 сут. изучали морфологию извитых семенных канальцев, подсчитывали количество клеток сперматогенеза, определяли индекс сперматогенеза (ИС) и ультраструктуру половых клеток. В культуру вносили вирус простого герпеса (ВПГ) или цитомегаловирус (ЦМВ) и каждые 2 сут. определяли вирусную нагрузку в культуральной жидкости.
Ультраструктурный анализ показал, что архитектоника органа и морфология половых клеток сохраняются in vitro в течение, по крайней мере, 16 сут. Жизнеспособность органной культуры яичка оказалась значительно выше, чем семенника мыши: снижение ИС в яичке составило 4%, в семеннике мыши - 50%.
Наиболее чувствительными к герпесвирусам оказались сперматоциты и сперматиды, в которых были обнаружены вирусные капсиды. В культуральной жидкости выявлено нарастание вирусной нагрузки, которая увеличивалась в 24 раза при заражении ЦМВ и в 165 раз - при заражении ВПГ.
Разработка органной культуры мужских гонад и получение модели ГВИ мужских гонад in vitro позволяет не только исследовать патогенетические механизмы, лежащие в основе нарушения фертильности у мужчин, но и разработать рекомендации по лечению таких пациентов.

органная культура мужских гонад, индекс сперматогенеза, вирус простого герпеса, цитомегаловирус, сперматоциты, сперматиды