Razrabotka organnoy kul'tury muzhskikh gonad dlya virusologicheskikh issledovaniy
- Authors: Tyulenev Y.A1, Naumenko VA1, Klimova RR1, Kurilo LF1, Shileyko LV1, Segal AS1, Kovalev VA1, Kushch AA1
-
Affiliations:
- Issue: Vol 5, No 4 (2010)
- Pages: 66-69
- Section: Articles
- URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/121487
- DOI: https://doi.org/10.23868/gc121487
- ID: 121487
Cite item
Abstract
Цель настоящей работы состояла в разработке культуральной системы, позволяющей сохранять жизнеспособность мужских половых клеток in vitro и оценивать влияние вирусов герпеса на сперматогенез. Для разработки условий культивирования мужских гонад проведены опыты с семенниками мышей DBA и с фрагментами яичек человека, полученных из операционного материала от пациентов после орхэктомии. Каждые 4 сут. изучали морфологию извитых семенных канальцев, подсчитывали количество клеток сперматогенеза, определяли индекс сперматогенеза (ИС) и ультраструктуру половых клеток. В культуру вносили вирус простого герпеса (ВПГ) или цитомегаловирус (ЦМВ) и каждые 2 сут. определяли вирусную нагрузку в культуральной жидкости.
Ультраструктурный анализ показал, что архитектоника органа и морфология половых клеток сохраняются in vitro в течение, по крайней мере, 16 сут. Жизнеспособность органной культуры яичка оказалась значительно выше, чем семенника мыши: снижение ИС в яичке составило 4%, в семеннике мыши - 50%.
Наиболее чувствительными к герпесвирусам оказались сперматоциты и сперматиды, в которых были обнаружены вирусные капсиды. В культуральной жидкости выявлено нарастание вирусной нагрузки, которая увеличивалась в 24 раза при заражении ЦМВ и в 165 раз - при заражении ВПГ.
Разработка органной культуры мужских гонад и получение модели ГВИ мужских гонад in vitro позволяет не только исследовать патогенетические механизмы, лежащие в основе нарушения фертильности у мужчин, но и разработать рекомендации по лечению таких пациентов.
About the authors
Yu A Tyulenev
Email: tulenev86@mail.ru
V A Naumenko
R R Klimova
L F Kurilo
L V Shileyko
A S Segal
V A Kovalev
A A Kushch
References
- Aflatoonian В., Ruban L., Jones M. In vitro postmeiotic germ cell development from human embryonic stem cells. Hum. Reprod. 2009; 24: 3150-9.
- Clark A.T., Bodnar M.S., Fox M. Spontaneous differentiation of germ cells from human embryonic stem cells. Hum. Mol. Genetics. 2006; 13: 727-39.
- Климова P.P., Чичев E.B., Науменко В.А. и др. Вирус простого герпеса и цитомегаловирус в эякуляте мужчин: вирус простого герпеса чаще встречается при идиопатическом бесплодии и коррелирует co снижением показателей спермы. Вопросы вирусологии 2010; 1: 12-16.
- Kotronias, D., Kapranos N. Detection of herpes simplex virus DNA in human spermatozoa by in situ hybridization technique. In Vivo 1998; 12: 391-4.
- Baskar J.F., Furnari В., Huang E.S. Demonstration of developmental anomalies in mouse fetuses by transfer of murine cytomegalovirus DNA-injected eggs to surrogate mothers. J. Infect. Dis. 1993; 167: 1288-95.