Влияние состава ростовой среды и концентрации фетальной сыворотки на пролиферативную активность фибробластов дермы



Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Применение дермальных фибробластов для терапевтических целей предполагает работу с большими объемами клеточного материала. Автоматизация процесса культивирования с помощью роботизированной станции обеспечивает высокую стабильность условий производства клеток и позволяет в короткие сроки наращивать биомассу фибробластов в соответствии с требованиями GMP. Для оценки влияния концентрации сыворотки на пролиферативную активность фибробласты культивировали в ростовой среде с различным содержанием данного компонента. Пролиферативную активность фибробластов оценивали по показателю среднего времени удвоения клеточной популяции. Для подбора оптимальной культуральной среды исследовали различные базовые и улучшенные среды производства Gibco и ПанЭко, а также их смеси. Показано, что экспоненциальное снижение времени удвоения клеточной популяции наблюдается при увеличении концентрации сыворотки от 0 до 12%, и при дальнейшем повышении ее содержания в среде данный показатель уменьшается незначительно. Наиболее высокая пролиферативная активность дермальных фибробластов отмечается при использовании среды aMEM, смеси сред aMEM с F-12, а также на смесях сред Advanced DMEM с F-12 и Advanced DMEM с RPMI-1640 производства Gibco, США.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Ф. А Фадеев

Уральский государственный медицинский университет; Институт медицинских клеточных технологий

Екатеринбург, Россия

Д. В Луговец

Институт медицинских клеточных технологий

Екатеринбург, Россия

М. В Улитко

Институт медицинских клеточных технологий

Екатеринбург, Россия

С. Л Леонтьев

Институт медицинских клеточных технологий

Екатеринбург, Россия

С. В Сазонов

Уральский государственный медицинский университет;Институт медицинских клеточных технологий

Екатеринбург, Россия

Список литературы

  1. Алексеев А.А., Попов С.В. Современные методы трансплантации культивированных клеток кожи и ее эквивалентов при лечении ожогов. Комбустиология 1999; 1: 22-5.
  2. Зорина А.И., Зорин В.Л., Черкасов В.А. Аутологичные дермальные фибробласты в коррекции возрастных и рубцовых дефектов кожи. Эстетическая медицина 2011; Х(2): 173-9.
  3. Thangapazham R., Darling T., Meyerle J. Alteration of skin properties with autologous dermal fibroblasts. Int. J. Mol. Sci. 2014; 15(5): 8407-27.
  4. Фадеев Ф.А., Сергеев А.Г. Использование первичных клеточных культур для лечения ожогов кожи. Вестник уральской медицинской академической науки 2013; 46(4): 134-7.
  5. Yu F., Yin J., Xu K. et al. Growth factors and corneal epithelial wound healing. Brain Res. Bull. 2010; 81(2-3): 229-35.
  6. Thomas R., Chandra A., Liu Ya. Manufacture of a human mesenchymal stem cell population using an automated cell culture platform. Cytotechnology 2007; 55: 31-9.
  7. Зорин В.Л., Копнин П.Б., Зорина А.И. и др. Оптимизация условий получения и ведения культур фибробластов кожи и десны человека. Гены и Клетки 2014; IX(2): 53-60.
  8. Takashima A. Establishment of fibroblast cultures. In: Bonifacino J., Harford J., Lippincott-Schwartz J. et al., editors. Curr. Protoc. Cell Biol. Chapter 2: Unit 2.1. Hoboken, N.J., USA: John Wiley&Sons Inc.; 2001. p. 2.1.1-12.
  9. Freshney R.I. Basic principles of cell culture. In: Vunjak-Novakovic G., Freshney R.I., editors. Culture of cells for tissue engineering. Hoboken, N.J., USA: John Wiley & Sons, Inc.; 2006. p. 4-22.
  10. EL-Ensahsy H., Abdeen A., Abdeen S. et al. Serum concentration effects on the kinetics and metabolism of heLa-S3 cell growth and cell adaptability for successful proliferation in serum free medium. World Applied Sciences 2009; 6(5): 608-15.
  11. Liu M., Hu P., Ding K. The effect of serum concentration on the growth, proliferation and collagen secretion in mouse L929 fibroblasts. Chinese J. Cell Mol. Immun. 2011; 27(7): 36-9.
  12. Rittie L., Fisher G. Fisher Isolation and Culture of Skin Fibroblasts. In: Varga J., Brenner D. A., Phan S. H., editors. Methods in Molecular Medicine; V. 117: Fibrosis Research: Methods and Protocols. Totowa, N.J: Humana Press Inc.; 2005. -p. 83-98.
  13. Ahearne M., Lysaght J., Lynch A. Combined influence of basal media and fibroblast growth factor on the expansion and differentiation capabilities of adipose-derived stem cells. Cell Regeneration 2014; 3: 13.
  14. Alt E., Yan Ya., Gehmert S. et al. Fibroblasts share mesenchymal phenotypes with stem cells, but lack their differentiation and colonyforming potential. Biol. Cell. 2011; 103: 197-208. 1 5. Калмыкова Н.В., Спичкина О.Г., Эллиниди В.Н. и др. Биопластический материала на основе гиалуроновой кислоты как матрица для создания биомедицинских клеточных экспресспродуктов для восстановления кожи. Гены и Клетки 2014; IX(2): 68-75.
  15. Sotiropoulou P., Perez S., Salagianni M. Characterization of the optimal culture conditions for clinical scale production of human mesenchymal stem cells. Stem Cells 2006; 24(2): 462-71.
  16. Калмыкова Н.В., Спичкина О.Г., Эллиниди В.Н. и др. Биопластический материала на основе гиалуроновой кислоты как матрица для создания биомедицинских клеточных экспресспродуктов для восстановления кожи. Гены и Клетки 2014; IX(2): 68-75.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Эко-Вектор, 2016


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: 

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах