TESKALTsIN KAK POTENTsIAL'NYY AGENT DIFFERENTsIROVKI MEZENKhIMNYKh STVOLOVYKh KLETOK ChELOVEKA

Abstract

Full Text

В предыдущих исследованиях было показано участие EF- hand Са2+- связывающего белка тескал-цина во многих важных процессах в человеческом организме. Некоторые исследователи показали, что экспрессия тескалцина необходима для диф-ференцировки мегакариоцитов, а также опосредует механизм переключения дифференцировки в некоторых клеточных типах. Принимая во внимание эти данные, можно предположить, что этот белок может быть использован в различных биомедицинских приложениях. В настоящем исследовании было обнаружено, что модуляция экспрессии тескалцина влияет на дифференцировку мезенхимных стволовых клеток человека (МСК), выделенных из жировой ткани человека в остеогенном и адипогенном направлениях. Поскольку нативные МСК не экспрессируют тескалцин, с помощью лентивирусной трансдукции были получены линии МСК с эктопической экспрессией тескалцина (МСК-TESC). Далее полученные МСК-TESC инкубировали в дифференцировоч-ной среде Stem Pro Osteogenesis или Adipogenes is differentiation media (ThermoFisherScientificInc., USA) 18 или 14 дней, соответственно. Окраска Oil Red O и von Kossa выявили сравнительно большее количество дифференцированных клеток в остеогенном и адипо-генном направлениях среди МСК со сверхэкспрессией тескалцина. Более высокий уровень интенсивности дифференцировки этих клеток наблюдали в сравнении с двумя контрольными линиями МСК и МСК с нокдауном тескалцина. С целью узнать больше о функции белка и выявить его потенциальные мишени, а также регуляторы, был проведён сравнительный транскриптомный анализ. МСК со сверхэкспрессией тескалцина обладали группой генов, понизивших свою экспрессию по сравнению с контролем, эта группа показала высокий уровень кластеризации. Функциональная аннотация выявленных генов позволила предположить, что тескалцин может быть связан с несколькими сигнальными путями заболеваний, таких как болезнь Чагаса и ревматоидный артрит; более того, были выявлены функциональные кластеры клеточной адгезии, нейроактивный лиганд-рецептор и цитокин-рецептор взаимодействий. Кластер генов сигнального пути хемокинов позволяет сделать предположение, что экспрессия тескалцина может иметь отношение к механизмам имунной регуляции. Таким образом, наше исследование рассматривает тескалцин с точки зрения нового агента дифференцировки стволовых клеток человека и описывает его возможную роль в патогенезе различных заболеваниях человека.