The use of autologous dermal fibroblasts in cosmetology

Abstract

Full Text

Введение. Ухудшение качества кожи по мере старения организма во многом определяется снижением активности и количества клеточной составляющей дермы. Поэтому не случайно, что радикальное решение проблемы коррекции возрастных изменений перенесено в область применения клеточных технологий для заместительной терапии. Целый ряд сложностей, выявленных при изучении последствий применения аллогенных клеток, выводит методы, использующие генетически идентичные реципиенту аутогенные клетки, в число исключительно возможных для практического использования. Однако, как показал многолетний опыт применения таких технологий (напр. Isolagen, США) их применению с целью коррекции возрастных изменений препятствует сложность работы с «взрослыми» клетками и ограниченный восстановительный потенциал клеток стареющего организма. Ранее нами было показано, что эти ограничения могут быть успешно преодолены при соблюдении следующих условий: - выбор участка для эксплантации (с наибольшей сохранностью потенциала фибробластов и с близким к лицевой области профилем экпрессии генов, определяющих синтез уникальных вариантов коллагена); - культивирование в среде, содержащей аутосыворотку и регуляторы экспрессии соответствующих генов; - контроль качества и безопасности клеточного материала, накапливающегося в ходе культивирования. Цель исследования: обоснование и разработка метода коррекции изменений кожи с использованием собственных (аутогенных) фибробластов кожи пациента, культивированных in vitro. Материал и методы. Клинические исследования проводили с 2005 г. сотрудниками Лаборатории молекулярных и клеточных технологий Уральской госмедакадемии с привлечением баз косметологических салонов и лечебно-профилактических учреждений Екатеринбурга. Работа выполнялась в соответствии с решением Этического комитета и Ученого совета Уральской госмедакадемии, утвердивших программу научно-исследовательских работ и протоколы доклинических и клинических исследований клеточных технологий. Исследование осуществлялось с учетом международных норм GLP и GCP. В испытаниях принимали участие 83 пациента в возрасте от 43 до 65 лет. Выбор зоны введения клеток для терапевтической коррекции кожи осуществлялся на основании субъективного определения наиболее проблемной области лица самим пациентом и мнения врача-косметолога. Количество однократно вводимых клеток варьировало в зависимости от объёма проблемной зоны и составляло в среднем от 3х106 до 15х106. Разовый объем вводимого препарата - 1-3 мл. Клетки вводили пациентам методом «папулы» для крупных морщин, обкалывания мелких морщин или равномерно на площадь проблемной зоны с помощью микроинъекций; введение повторялось 2-4 раза с 7-10-дневными перерывами. Изменения кожи после трансплантации отслеживались в динамике на протяжении 7 лет. Степень внешней косметической коррекции оценивалась как специалистами, так и самими испытуемыми. Пациенты с периодичностью в 3 мес. заполняли специальную анкету, в которой отмечали степень положительной динамики, побочные эффекты, их выраженность и продолжительность. Испытуемые оценивали общую степень своей удовлетворенности косметическим эффектом по 10-балльной шкале. За «0» принималась субъективная оценка состояния кожи до начала испытаний. Полная, с субъективной точки зрения пациента, ликвидация признаков старения кожи в зоне введения клеток оценивалась 10 баллами. Экспертная оценка производилась по аналогичной шкале двумя специалистами с усреднением результатов на завершающем этапе испытания. Результаты. Все испытуемые после введения аутофибробластов отмечали положительный косметический эффект в проблемной области, заключавшийся в уменьшении выраженности крупных и мелких морщин, кожных дефектов, а также в общем улучшении состояния кожи лица в области трансплантации фибробластов. Наблюдалась стойкая динамика прогрессирования положительного косметологического эффекта с течением времени. Наибольшая его выраженность отмечена к 15-18 мес. после терапии с последующим снижением в течение 4 лет. Примечательно, что 43 пациента обратились повторно, а 26 - более 2 раз с целью косметической коррекции других зон тела (кисти рук, зона декольте, передняя брюшная стенка, колени). Коррекция проводилась с использованием «персональных» клеточных линий, хранящихся в жидком азоте. Выводы. Положительный клинический эффект применения препаратов фибробластов у пациентов в возрасте 43-65 лет указывает на сохранение восстановительного потенциала фибробластов ягодичной области, что позволяет использовать их для коррекции возрастных изменений кожи. Выраженность и продолжительность позитивного эффекта может быть обусловлена усилением экспрессии вводимыми клетками гена Coll 11A1, кодирующего синтез коллагена XI, не склонного к формированию многовалентных сшивок. Предстоящие исследования в этом направлении должны быть нацелены на оптимизацию схем терапии и объективизацию отдаленных результатов.