Algorithm obtaining of the hematopoietic stem cells peripheral blood for autologous transplantation

Abstract

Full Text

Введение. Выделение гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) из периферической крови - малоинвазивный и безопасный метод получения материала для трансплантации в онкогематологии. Однако в периферической крови содержится незначительное количество ГСК. Сочетание медикаментозной мобилизации ГСК в периферический кровоток с современными методами лейкоцитафереза позволяет получить из периферической крови достаточное для трансфузии количество ГСК. Однако реализовать данную задачу часто бывает не просто. Трудности связаны с индивидуальной кинетикой мобилизации ГСК, вследствие специфических изменений костного мозга в результате заболевания и проводившегося лечения. Наиболее сложными вопросами при получении трансплантационного материала является определение момента для проведения лейкоцитафе-реза, выбор оптимальной продолжительности операции и ее кратности. Использование четкого методического алгоритма позволит оптимально решать эти вопросы в конкретной клинической ситуации. Цель исследования. Апробировать алгоритм получения ГСК из периферической крови для аутогенной трансплантации. Материал и методы. Объектом исследования являлись 18 пациентов с онкогематологическими заболеваниями, которым была проведена аутотрансплантация ГСК периферической крови. Для мобилизации ГСК пациентам вводился внутримышечно ци-клофосфомид однократно 4 г/м2 поверхности тела. Через 5 сут. назначалось ежедневное подкожное введение филграстима 10 мкг/кг массы тела, включительно до завершения операции получения ГСК на клеточном сепараторе Haemonetics MSC+. В ходе лечения было необходимо определить оптимальный момент для получения трансплантационного материала. Данная задача решалась путем ежедневного мониторинга количества ГСК периферической крови пациентов в течение мобилизации. Когда количество ГСК в периферической крови превышало уровень >10 ГСК/мкл, принималось решение о начале лейкоцитафереза. Для определения количества ГСК в периферической крови при проведении лейкоцитафереза, после завершения стандартной программы операции на сепараторе Haemonetics MSC+, венепункцией отбиралась проба периферической крови. Одновременно выполнялось исследование количества ГСК в аликвоте, полученной из продукта лейкоцитафереза. В случае набора трансплантационной дозы лейкоцитаферез завершали. Если трансплантационная доза не была набрана, а количество ГСК в периферической крови сохранялось не менее 10 ГСК/мкл, лейкоцитаферез продолжали. Если уровень ГСК в периферической крови становился ниже данного значения, но трансплантационная доза не была набрана, лейкоцитаферез прекращали. Затем продолжали введение филграстима и через 8-12 ч проводили повторный лейкоцитаферез, если уровень ГСК в периферической крови достигал не менее 10 ГСК/мкл. Для определения количества ГСК использовали проточный цитометр CYTOMICS FC 500 с набором моклональных антител «Stem-KitReagents». Результаты и обсуждение. У всех 18 пациентов в процессе мобилизации была достигнута целевая концентрация ГСК в периферической крови не ниже 10 ГСК/мкл на 5-17 сут. У 5 из 18 пациентов, по завершению стандартной программы лейкоцитафереза на цитосепараторе Haemonetics MSC+ была получена трансплантационная доза ГСК/кг. В конце стандартной программы лейкоцитафере-за у 5 из остальных 13 пациентов, которым не была набрана трансплантационная доза, количество ГСК в периферической крови оставалось на уровне >10 ГСК/мкл. Лейкоцитаферез у этих 5 пациентов был пролонгирован, и трансплантационная доза была получена. У оставшихся 8 пациентов, которым не удалось набрать трансплантационную дозу при стандартной программе лейкоцитафереза, количество ГСК в периферической крови в конце операции оказалось ниже 10 ГСК/мкл. Операция была остановлена и введение филграстима продолжено. У 6 из этих 8 пациентов через 6-8 ч после окончания первого лейкоцитафереза количество ГСК в периферической крови вновь повысилось более 10 ГСК/мкл. Им был выполнен повторный лейкоцитаферез, и трансплантационная доза в итоге была набрана. Таким образом, разработанный алгоритм пролонгирования процедуры лейкоцитафереза позволил сократить количество повторных операций, и в итоге удалось получить трансплантационную дозу в 90% клинических случаев. Выводы. Разработанный алгоритм тактики получения трансплантационной дозы ГСК периферической крови пациентов часто позволяет исключить повторный лейкоцитаферез и снижает медикаментозную нагрузку при выполнении мобилизации.