PGD: a rational reproductive choice for carriers of single-gene disorders

Abstract

Full Text

Преимплантационная генетическая диагностика (ПГД) - группа методов диагностики наследственных заболеваний у эмбриона человека до его переноса в полость матки. ПГД позволяет семьям с носительством наследственного заболевания управлять риском зачатия больного ребенка в контролируемых условиях лаборатории, где такой риск может быть адекватно оценен и исключен. В докладе подробно рассмотрены подходы, применяемые в ПГД различных типов генных мутаций: точечных замен оснований, небольших делеций или инсерций, крупных делеций с неточно известными краями, экспансий триплетных повторов. Большинство методик, применяемых в ПГД моногенных заболеваний, так или иначе основаны на ПЦР; вместе с тем, применение ПЦР в ПГД имеет ряд особенностей как при разработке теста, так и при интерпретации результатов. В ПГД недопустимо следование лишь общим принципам разработки тест-систем, применяемым в молекулярной генетике. Классический пример - риск неамплификации аллеля (ADO), который следует компенсировать с помощью фланкирующих маркеров с обеих сторон от мутации. Учитывая этот и ряд других принципов, выработанных на практике и рекомендованных международными сообществами (в частности, ESHRE, Европейским сообществом эмбриологов и репродуктологов), ПГД может быть доведена до уровня рутинного метода в надежной специализированной лаборатории. Основным техническим препятствием к проведению ПГД является фактор, строго говоря, не имеющий непосредственного отношения к применяемым в ПГД методикам, а именно сложность постановки молекулярного диагноза - выявления конкретной мутации, приводящей к развитию заболевания. Даже в тех случаях, когда косвенная диагностика мутации по сцепленным гаплотипам может заменить собой прямую, и знание точной молекулярной природы мутации для проведения ПГД не обязательно, необходимо по меньшей мере определить ген и гаплотип, ассоциированный с заболеванием в конкретной семье; в случае ряда клинических диагнозов (например, анемия Фанкони, синдром Альпорта) таких генов-кандидатов может быть несколько, и прямой поиск неизвестной мутации в них требует значительных усилий и средств. Надежду на постановку точного молекулярного диагноза в таких случаях дают методы, основанные на секвенировании нового поколения (NGS). Популярность ПГД в качестве репродуктивного решения стабильно растет. Это объясняется не только повышением технологичности метода, но и рядом фундаментальных преимуществ ПГД по сравнению с альтернативными подходами в группах риска. Немаловажным преимуществом ПГД по сравнению с пренатальной диагностикой, помимо очевидного снижения риска искусственного прерывания беременности, является возможность одновременного анализа нескольких эмбрионов. Это позволяет проводить одновременно с тестом на мутацию анализ на гистосовместимость (гаплотипирование HLA) или на хромосомные аберрации (aCGH), и рассчитывать при этом на относительно высокую вероятность найти эмбрион, удовлетворяющий обоим критериям. Согласно статистике ESHRE, в мире проведено несколько десятков тысяч циклов ПГД на моногенные заболевания, завершившихся рождением здорового ребенка. Собранные с 1997 г. данные свидетельствуют о том, что именно ПГД становится рационально обоснованным выбором для семей из групп риска, планирующих беременность и рождение здорового ребенка.