Concentration of nuclear heterochromatine in buccal epithelium cells in groups of patients with various degree of diseases as the bioage index

Abstract

Full Text

Существуют различные методики определения биовозраста человека, однако по-прежнему требуются точные, недорогие, быстрые и неинвазивные способы определения связанных с биовозрастом показателей. На жизненные функции влияют заболевания, увеличивая вероятность смерти, что позволяет рассматривать их как факторы, ускоряющие старение и увеличивающие биологический возраст (В.Н. Мещанинов, 2011). Однако определение биологического возраста по комплексу психо-физиологических параметров с использованием нагрузочных проб в остром и подостром периоде течения заболеваний ограничено (А.В. Токарь, 1990; Л.М. Белозерова, 2000). Одним из возможных способов устранения этих противопоказаний является определение гетерохроматина в ядрах клеток, как показателя транскрипционной активности в соматических клетках. Клетки буккаль-ного эпителия человека просты в получении для анализа и способны отражать его функциональное состояние (В.Г. Шахбазов, 2001; Ю.Г. Шкорбатов, 2010). Степень конденсации вещества хромосом чувствительна к внешним воздействиям (О.В. Мя-чина, 2012; И.К. Волошин-Гапонов, 2013), это позволяет предположить ее зависимость от возраста и от некоторых заболеваний. Цель исследования. Оценить возможности использования определения содержания хроматина в ядрах клеток буккального эпителия человека в качестве маркера биовозраста и функционального состояния. Материал и методы. Исследование выполнено на 37 добровольцах мужского (20 чел.) и женского пола (17 чел.) с календарным возрастом от 26 до 75 лет. Привлекались пациенты стационара кардиологического отделения (19 чел.), с диагнозом: «ИБС. Нестабильная стенокардия. Гипертоническая болезнь III ст., р.4. ХСН I-II ФК по NYHA, I ст. по Н.Д. Стражеско - В.Х. Василенко. Метаболический синдром», и практически здоровые люди (18). Получение периферической крови и слюны, содержащей клетки буккального эпителия производили в 8.30 утра. Общие биохимические показатели, отражающие обмен белков, липидов, углеводов, исследовали на биохимическом иммуноферментном анализаторе (Chem Well, Awareness Technologies, США) в сыворотке крови пациентов с использованием реактивов «SPINREACT» (Испания). В периферической крови пациентов определяли общие гематологические показатели (гематологический анализатор ERMA PCE 90VET, Walpole, США). Для оценки геро-профилактического эффекта определяли биовозраст (программа «BIOAGE Polinom», Свидетельство № 2012613817) (Токарь А. В. и др., 1990; Гаврилов И.В. и др., 2012). Препарат клеток буккально-го эпителия окрашивали ацеторсеином и оценивали интенсивность окрашивания ядер при помощи светового микроскопа (Mikros МС 300ТЕХВ, триноку-лярный, флюоресцентный с оптикой ICO Infinitive, Micros, Австрия). Статистическая обработка результатов исследований проводилась методами вариационной статистики с применением программного комплекса Stata 6.0 (Stata Corporation, США). Результаты и обсуждение. Среднее отклонение биологического возраста от паспортного в группе практически здоровых людей составило 10 лет, против 4 лет у больных при значительно большей дисперсии, что свидетельствует об увеличении биовозраста при патологии, а также о различном влиянии патологии на функциональные параметры организма. Коэффициент корреляции биовозраста и содержания гетерохроматина во всех группах оказался достаточно значимым (от -0,79 до -0,89), за исключением группы мужчин с сердечно-сосудистыми заболеваниями, где он имеет обратное направление (+0,4). Сравнение биовозраста с биохимическими показателями и с показателями гематологии у пациентов стационара не дали выраженной корреляционной зависимости, кроме содержания сегментоядерных нейтрофилов (r = -0,52, р < 0,05). Таким образом, определение содержания гетерохроматина может быть использовано в диагностических целях для дополнения методики определения биовозраста и расширения показаний к ее использованию. Выводы. Содержание гетерохроматина в ядрах клеток буккального эпителия здоровых мужчин и женщин различных возрастных групп, а также женщин, имеющих сердечно-сосудистые заболевания, достоверно коррелирует с их биологическим возрастом.