Treatment of full breaks forward superficial flexor in horses with use of multipotent mesenchymal stromal cells derived from adipose tissue

Abstract

Full Text

Одной из актуальных проблем практикующих ветеринарных врачей, являются травмы сухожилия поверхностного пальцевого сгибателя (СППС). Чаще всего этой патологией страдают высокопородные лошади, которые подвергаются повышенным нагрузкам во время тренировок и соревнований. При такой травме лошадь выбывает из работы на срок около года. Современные методы лечения разрывов СППС подразумевают под собой сращение сухожилия за счет соединительнотканного рубца. В случае успешного лечения сухожилие теряет свою естественную эластичность, поэтому нагрузки на лошадь должны быть снижены, и она может быть выбракована из работы. Помимо этого риск рецидива травмы достигает 80%. Практикующие ветеринарные врачи уже давно ведут поиск эффективных и безопасных способов лечения травм СППС. Врачами Центра Ветеринарной Клеточной Медицины был предложен метод инъекции суспензии аутогенных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) непосредственно в место травмы сухожилия. Диагноз разрыва подтверждался на основании клинических признаков, результатов осмотра, пальпации и УЗИ сухожилия. При подтвержденном диагнозе у лошади, под местным обезболиванием в районе основания хвоста через разрез 1-1,5 см забирался фрагмент подкожного жира объемом 0,5-1,0 см3, который помещался в пробирку с транспортной средой и отправлялся в лабораторию. В лаборатории из полученного биоптата выделялись клетки стромаль-васкулярной фракции методом ферментативного расщепления. Затем полученные клетки помещали в среду (DMEM/ F12 (StemCell Technology, США) с добавлением FBS (Biological Industries, Израиль) до 10% с добавлением 2 мМ L-глутамина (StemCell Technology, США), 100 ед/мл пенициллина и 100 мг/мл стрептомицина (StemCell Technology, США) для дальнейшей экспансии ММСК. Смену среды проводили каждые 3-4 сут. Через 10-14 дней выращенные ММСК помещались в стерильный шприц с физиологическим раствором, содержащем аутосыворотку. Инъекция производилась под контролем УЗИ, после чего лошадь полностью исключалась из работы. Период реабилитации занимал в среднем 42-48 нед. В течение этого времени лошадь подвергалась постепенно увеличивающимся нагрузкам. При этом, с определенной периодичностью мониторировалось состояние сухожилия - с интервалом в месяц выполнялось УЗИ. При последовательном изучении результатов УЗИ было отмечено постепенное восстановление сухожилия за счет образования волокон, которые ориентированы по продольной оси сухожилия. Грубый соединительнотканный рубец отсутствовал. Это же было подтверждено и патоморфологическими исследованиями. За 2 года нами было излечено 18 лошадей с тенденитами различной степени тяжести. 11 из них полностью восстановились после травмы и вернулись к максимальным нагрузкам. 3 лошади находятся в реабилитационном периоде, но уже приступили к рысистой работе. У 4 лошадей был рецидив, который объясняется нарушением режима реабилитации. Из вышесказанного можно сделать вывод, что предложенный нами метод использования аутогенных ММСК для лечения травм сухожилия поверхностного пальцевого сгибателя у лошадей, позволяет добиться полного восстановления тканей сухожилия, сохранить его упругость и эластичность. В результате дорогие породистые лошади могут вернуться к соревнованиям и испытаниям.