MPROVING THE TECHNOLOGY OF INFLUENZA VACCINE

Abstract

Full Text

Грипп - острое респираторное заболевание вирусной этиологии, протекающее с явлениями общей интоксикации и поражением респираторного тракта. Самым эффективным методом снижения количества инфицированных является вакцинация. Вакцины, приготовленные на культурах клеток Vero и MDCK, лицензированы для профилактики гриппа в Европе и США. Российских аналогов культуральных вакцин против гриппа на фармацевтическом рынке нет. ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» разработана технология производства живой гриппозной вакцины «Вектор-Флю» на основе клеток MDCK, культивируемых в бессывороточных питательных средах на микроносителях. Поскольку в производстве вакцины используются компоненты импортного производства, она остается достаточно дорогостоящей. Разработка технологии производства вакцины, содержащей компоненты отечественного производства, и культивирование клеток в суспензии могли бы существенно удешевить производство вакцины. Целью исследования стало изучение технологических подходов перевода культуры клеток MDCK из монослойной в суспензионную. Материал и методы. Исследовалось влияние различных концентраций метилцеллюлозы и альгината натрия, введенных в ростовую питательную среду, на адгезивную способность, пролиферативную активность и жизнеспособность клеток MDCK. Культивирование клеток MDCK проводили в культуральных флаконах с площадью рабочей поверхности 25 см2 в питательной среде Игла МЕМ производства ГУП «Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова» РАМН (Россия), содержащей 0,5-5% сыворотки крови плодов коров (Sigma, США), 0,05 мг/мл гентамицина сульфата, метилцеллюлозу и альгинат натрия в различных концентрациях (Sigma, США). Результаты. Влияние метилцеллюлозы и альгината натрия на пролиферацию культуры клеток оценивали путем определения индекса пролиферации с помощью окрашивания клеток трипановым синим и подсчета в камере Горяева, за их влиянием на адгезивную способность клеток следили визуально. В результате исследований было показано, что метилцеллюлоза в концентрации 1% и альгинат натрия в концентрации 0,5% влияют на адгезивную способность культуры клеток MDCK: культура клеток переходит в суспензию и не адгезируется к поверхности культуральных флаконов. Выводы. В результате проведенного исследования установлено, что метилцеллюлоза в концентрации 1% и альгинат натрия в концентрации 0,5% могут быть использованы в технологии производства гриппозной вакцины в качестве добавки к ростовой питательной среде для суспензионного культивирования клеток MDCK. Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки России.