Immunomodulatory effect of mesenchymal stem cells on allergen activated lymphocytes

Abstract

Full Text

Известно, что мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) способны оказывать супрессивное действие на функциональную активность T-лимфоцитов, B-лимфоцитов, дендритных клеток и естественных киллеров (NK). Эти свойства позволяют рассматривать ММСК в качестве возможного средства клеточной терапии иммунопатологических состояний, в том числе аллергических реакций. Характер действия ММСК на лимфоидные клетки, участвующие в аллергических реакциях, остается мало известным. Цель работы состояла в исследовании влияния аллогенных ММСК на стимулированные аллергенами лимфоциты пациентов, страдающих аллергией. Материал и методы. ММСК были получены из пупочного канатика при неосложненных родах (при наличии подписанного информированного согласия) в соответствии с принятыми протоколами. Из крови пациентов с пищевой моноаллергией на градиенте фиколла выделяли лейкоцитарную фракцию. Клетки суспендировали в концентрации 5 млн/ мл в ростовой среде RPMI с 10% фетальной бычьей сыворотки, добавляли раствор аллергена и вносили в лунки 6-луночного планшета, содержащего культуру ММСК в состоянии 70% конфлюентности. Сокультивирование клеток в присутствии аллергена проводили в течение 3 сут. Контролями служили лейкоциты тех же пациентов, интактные, или инкубированные с аллергеном в отсутствии ММСК. Поверхностные лимфоцитарные маркеры выявляли с помощью меченных флуорохромами антител на проточном цитофлуориметре FC500 Beckman Coulter. Содержание IgE, IL10 и IL4 в культуральной жидкости определяли методом иммуноферментного анализа. Результаты. При инкубации лейкоцитов с аллергенами процентное содержание популяций B-(CD19+) и T-CCD3 + ) лимфоцитов, а также Т-хелперов (CD3 + , CD4+) и Т-цитотоксических клеток (CD3+, CD8+) соответствовало контрольным значениям и не изменялось в присутствии ММСК. В то же время культивирование лейкоцитов с аллергеном увеличивало фракцию активированных Т-лимфоцитов (CD45+, CD3+, HLA-DR+), которая при этом достигала 17-19%. При сокультивировании стимулированных аллергеном лейкоцитов с ММСК количество активированных Т-лимфоцитов не превышало 5%, что соответствовало значениям, характерным для лимфоцитов, не активированных аллергеном. Присутствие ММСК при инкубации лейкоцитов с аллергеном вызывало повышение секреции противовоспалительного цитокина - IL-10 и одновременно снижение продукции IL4 и эффекторной молекулы аллергического иммунного ответа - IgE. Описанную систему можно рассматривать как модель для изучения влияния ММСК на эффекторное звено аллергических реакций.