Indutsirovannye plyuripotentnye stvolovye kletki cheloveka vpervye polucheny bez ispol'zovaniya integriruyushcheysya v genom DNK

Пролиферативный и дифференцировочный потенциалы эмбриональных стволовых клеток СЭСК) и индуцированных плюрипотентных стволовых клеток UPS-клеток) человека позволяют получить в лабораторных условиях все типы специализированных клеток, присутствующих во взрослом организме человека [1-3]. Однако в случае ЭСК аутогенный материал, как правило, недоступен, в то время как iPS-клетки, созданные с помощью генноинженерных методик из соматических клеток, могут стать ключом для массового применения клеточной терапии различных заболеваний, при которых необходимо восстановить поврежденные в результате травмы или патологического процесса ткани и органы пациента.
Индукция плюрипотентности как у мышиных, так и у человеческих соматических клеток была впервые достигнута интеграцией в их геном комбинаций факторов oct4, sox2, с-Мус, klf4, nanog и Iin8 [2-4]. В первых разработанных методиках перепрограммирования применялись вирусные векторы, встраивающиеся в ДНК клетки-реципиента [2, 3]. Такие векторы могут провоцировать инсерционные мутации, которые нарушают функции клеток, влияют на дифференцировку в определенных направлениях [2], в некоторых случаях приводят к канцерогенезу [5]. На сегодняшний день существуют экспериментальные работы по получению iPS-клеток животных с помощью аденовирусных векторов, не интегрирующихся в геном, и плазмид [6,7], но эффективность этих методов крайне мала [2, 3].
Недавно появились сообщения сразу о двух способах получения iPS-клеток мыши и человека с последующим удалением из них трансгена. В одном из подходов была применена Cre/LoxP рекомбинация [8]. Однако рекомбиназа Сге, вырезая из ДНК клетки трансген, оставляет в ней часть вектора, что нежелательно. Во втором случае в качестве носителя генов плюрипотентности использовался транспозон PiggyBac, затем схожим образом удалявшийся из дифференцированного потомства iPS-клеток [9]. Несмотря на то, что этот подход - весьма многообещающий, удаление из клеток большого числа копий транспозона, встраивающихся в геном, довольно сложная задача, вряд ли совместимая с клиническими нуждами.