Липополисахарид-индуцированная модель воспаления в клеточных культурах

Полный текст

ВВЕДЕНИЕ

Воспаление — это неспецифическая защитная реакция, возникающая в ответ на различные инфекционные и неинфекционные факторы и сопровождающаяся гибелью клеток. Данный процесс является одним из ключевых звеньев, встроенных в патогенез огромного числа нозологий: инфекционных, экологических (воздействие асбеста, тяжёлых металлов и т.д.), иммунных (ревматоидный артрит, остеоартрит, волчанка и т.д.), онкологических, сердечно-сосудистых (поражение сосудов, ишемия, артериальная гипертензия и т.д.) и неврологических (болезнь Альцгеймера, инсульт и т.д.), а также диабета, подагры и даже депрессии. Следует отметить, что неразрешающийся воспалительный каскад приводит к массивной альтерации клеток и смерти [1].

Степень активности патологического процесса определяется цитокинами, которые продуцируются в очаге воспаления [2]. Некоторые заболевания, в частности новая коронавирусная инфекция SARS-CoV-2, могут сопровождаться «цитокиновым штормом», обусловленным значительным повышением уровня IL-6, IL-1β, TNF-α и других цитокинов и приводящим к заметному повреждению тканей и органов [3]. При этом само воспаление включает сложные взаимодействия не только между биологически активными веществами, но и между клетками, вовлечёнными в него [4]. Совокупность всех этих факторов может приводить в конечном итоге к изменению функций и пролиферативной активности клеток, что также обусловлено влиянием на сигнальные клеточные системы NF-κB, MAPK и JAK/STAT [5–8].

Детальное изучение механизмов воспаления осуществляют с помощью моделирования. Наиболее достоверные результаты, отражающие роль отдельных звеньев воспалительного процесса, можно получить путём создания моделей in vitro. Данная методика позволяет контролировать условия, в которых протекает эксперимент. Для моделирования воспаления in vitro на клеточных культурах применяют различные способы, которые можно условно разделить на септические и асептические. Модели септического воспаления можно создавать путём обработки клеточных культур бактериями, бактериальными лизатами или с помощью вирусной стимуляции [9–11]. Асептическое воспаление инициируется с помощью различных стимуляторов, вызывающих продукцию провоспалительных цитокинов [12–15]. Кроме того, существуют клеточные линии (например, CaСo-2 — линия клеток колоректальной аденокарциномы человека, HT29 — линия клеток проксимальных канальцев здоровой почки), которые обладают способностью к секреции IL-6, IL-8, IL-1β, TNF-α и других цитокинов, что позволяет имитировать условия воспаления [16]. Однако, несмотря на разнообразие методов моделирования воспаления, во многих работах в качестве провоспалительного агента используют бактериальный липополисахарид (ЛПС) — основной компонент внешней мембраны грамотрицательных бактерий [17]. Механизм воспалительной реакции, вызываемой стимуляцией с помощью ЛПС, заключается в активации толл-подобного рецептора 4 (TLR4), расположенного на мембране клеток, и запуске сигнальной системы NF-κB, которая опосредует транскрипцию и трансляцию таких провоспалительных медиаторов, как IL-6, TNF-α и других [18].

Данный протокол легко воспроизводим и доступен. Так, в сравнении с ЛПС-индуцированным воспалением при создании септических моделей возникают риски при работе с инфекционным материалом, а при использовании специализированных клеточных линий нужно соблюдать особые условия для их транспортировки и культивирования, что приводит к дополнительным затратам.

Простота метода позволяет применять его на различных культурах клеток. Проявление воспалительного ответа при стимуляции ЛПС-фактором на различных клеточных культурах является предметом изучения настоящего обзора. Проанализированы источники литературы за 2012–2022 гг. в базах данных eLIBRARY.RU, PubMed, Scopus и Web of Science.

ЛИПОПОЛИСАХАРИД-ИНДУЦИРОВАННОЕ ВОСПАЛЕНИЕ В МОНОКУЛЬТУРАХ

Механизмы воспаления и способы его уменьшения in vitro во многих работах изучают на монокультурах, что позволяет установить, каким образом те или иные клетки участвуют в патологическом процессе. В большинстве исследований воспаление моделировали на культурах макрофагов (RAW264.7) и моноцитов (THP-1, линия клеток острого моноцитарного лейкоза), что объясняется не только участием этих клеток в воспалительной реакции организма, но и созданием легко воспроизводимой рабочей модели воспаления. Так, в подобной модели S. Wang с соавт. [19] обнаружили снижение жизнеспособности клеток и повышенную секрецию TNF-α, IL-1β и простагландина E2 (PGE2), доказывающую развитие воспалительного ответа на культуре мышиных макрофагов, и продемонстрировали классическое развитие воспаления через активацию сигнальных систем NF-κB и MAPK. M. Ai с соавт. [20] также показали, что при обработке ЛПС макрофаги RAW264.7 усиливали выработку воспалительных медиаторов, и отметили повышенную экспрессию их генов. Однако в отличие от предыдущей работы [19] количество жизнеспособных клеток возрастало [20]. Противоречивые данные при одинаковых условиях моделирования, вероятнее всего, объясняются лишь тем, что линии клеток были получены из разных источников (табл. 1).

 

Таблица 1. Липополисахарид-индуцированная модель воспаления

Источник	Используемые клетки и источник получения	Доза и время обработки клеток ЛПС	Исследуемые цитокины и результаты	Анализ жизнеспособности клеток после стимуляции ЛПС	Ингибирование ЛПС-индуцированного воспаления
[19]	RAW264.7 Клеточная линия мышиных макрофагов (FuDan IBS Cell Center, Шанхай, Китай)	1 мкг/мл 24 ч	↑ TNF-α, IL-1β, PGE2	↓ до 80%	Сульфатированный полисахарид из Saccharina japonica уменьшал воспаление, блокируя сигнальные пути MAPK/NF-kB
[20]	RAW264.7 Клеточная линия мышиных макрофагов (Американская коллекция типовых культур)	1 мкг/мл 24 ч	↑ IL-1β, IL-6, TNF-α	↑ на 50%	Цирсилинеол снижал воспалительную реакцию, ингибируя сигнальные пути TLR4/NF-kB/IKK
[21]	THP-1 Линия клеток острого моноцитарного лейкоза (Американская коллекция типовых культур)	1 мкг/мл 3 ч	↑ IL-1β, IL-6, TNF-α	↑ на 10%	Линусорбы (B2 и B3), ингибируя ЦОГ-2 и NF-kB, уменьшали воспаление
[22]	THP-1 Линия клеток острого моноцитарного лейкоза (KansaiAnimalCare)	Первая стимуляция: 10, 100 или 1000 нг/мл 24 ч Вторая стимуляция: 100 нг/мл 5 ч	↑ IL-10, IL-6, TNF-α после первой стимуляции; ↓ IL-10, TNF-α после второй стимуляции	Не проводился	Гидролизат сывороточного протеина уменьшал воспаление, снижал толерантность к эндотоксинам
[23]	Макрофаги Первичные культуры, полученные из костного мозга и брюшины мышей C57BL/6J	100 нг/мл 4 ч	↑ IL-1β, IL-6, TNF-α	Не проводился	Дексмедетомидин ингибировал воспаление, подавляя гликолиз
[24]	A549 Линия клеток рака лёгкого человека (KCLB, Сеул, Корея)	10 мкг/мл 6 ч	↑ IL-6, TNF-α	Не проводился	Кверцетин уменьшал воспаление благодаря антиоксидантным свойствам
[25]	MRC-5 Клеточная линия фетальных фибробластов лёгких человека (Американская коллекция типовых культур)	100 нг/мл 18 ч	↑ IL-6, TNF-α	↓ в 2 раза	Нокаут циркулярной РНК circAtp9b приводил к подавлению воспалительных эффектов
[26]	CaCo-2 Клеточная линия, полученная из клеток колоректальной аденокарциномы человека (Американская коллекция типовых культур)	Не указано	↑ IL-1β, IL-6, TNF-α	Не проводился	Логанин снижал эффекты ЛПС, подавляя сигнальные пути NF-kB и JAK/STAT
[27]	HK2 (Human kidney 2) Клеточная линия, полученная из клеток проксимальных канальцев здоровой почки (Procell, Ухань, Китай)	2 мкг/мл 12 ч	↑ IL-1β, IL-6, TNF-α	↓ в два раза	Нокаут NKILA в исследуемых клетках приводил к уменьшению воспаления
[28]	HAPI Клеточная линия, полученная из обогащённой первичной культуры микроглии крыс 3-го дня жизни после рождения (Sigma-Aldrich, США)	5 нг/мл 20 ч	↑ PGE2, TNF-α	Не проводился	Прекондиционирование ингибиторами SIRT1/SIRT2 приводило к уменьшению воспаления
[29]	HUVEC Клеточная линия эндотелиальных клеток, полученных из вен пуповины человека	1 мкг/мл 24 ч	↑ IL-8, IL-6	↓ в два раза	Применение IL-35 имело ингибиторный эффект благодаря активации STAT1-/STAT4-систем
Источник	Используемые клетки и источник получения	Доза и время обработки клеток ЛПС	Исследуемые цитокины и результаты	Анализ жизнеспособности клеток после стимуляции ЛПС	Ингибирование ЛПС-индуцированного воспаления
[30]	Клетки рака лёгкого A549/Клетки острого моноцитарного лейкоза THP-1 Клеточные линии (Американская коллекция типовых культур)	1 и 2 мкг/мл 6, 12, 24 и 48 ч	↑ IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α	↓ ниже 80% при дозировке ЛПС от 4 мкг/мл	Не проводилось
[31]	Клетки рака лёгкого A549/Макрофаги и дендритные клетки, произошедшие из моноцитов Клеточная линия/Моноциты периферической крови, полученные из лейкоцитарных пленок	1 мкг/мл 48 ч	↑ IL-8, IL-1β, TNF-α	Не проводился	Применение метилпреднизолона приводило к подавлению провоспалительных реакций
[32]	Культура нейронов и нейроглии/Культура ММСК Первичная культура задних рогов спинного мозга/Первичная культура жировой ткани	10 мкг/мл 2 ч	↑ IL-6, TNF-α (выделялись нервными клетками); ↓ IL-10 (выделялись ММСК)	Не изменилась	ММСК уменьшали провоспалительную реакцию при сокультивировании с нервными клетками за счёт иммуномодулирующих свойств
[33]	Нейроны, микроглиальные клетки и астроциты Первичные культуры клеток коры новорождённых крысят	5 мкг/мл 48 ч	↑ TNF-α, IL-1α, IL-1β, IL-6	Не проводился	Не изучался
[34]	bEEC/ММСК Первичная культура эпителиальных клеток эндометрия крупного рогатого скота/Первичная культура из бычьей жировой ткани	0,1 мкг/мл 6 ч	↓ TNF-α, IL-1β, IL-6 при сокультивировании	Не проводился	Подавление сигнальных путей систем JAK и MAPK с помощью ММСК приводило к снижению воспалительного ответа
[35]	BV2/661W Клеточная линия мышиных микроглиальных клеток (Qinqi)/Клеточная линия фоторецепторов мышей (Офтальмологический центр больницы Сунь Ят-Сена)	10 мкг/мл 24 ч	↑ TNF-α, IL-1β, IL-6	Не проводился	Применение экзосом ММСК оказывало противовоспалительный эффект, стимулируя miR-146a и подавляя Nr4a3
[36]	CaCo-2/MIMVEC Клеточная линия, полученная из колоректальной аденокарциномы человека (Китайская национальная инфраструктура ресурсов клеточных линий)/Первичная культура микроваскулярных эндотелиальных клеток из кишечника мышей	1 мкг/мл 24 ч	↑ IL-8	Не изменилась	Кемпферол снижал воспалительный ответ путём ингибирования активации сигнального пути NF-κB
[37]	3T3-L1/RAW264.7 Клеточная линия преадипоцитов/Клеточная линия мышиных макрофагов (Procell Life Science Technology Co, Ltd.; Ухань, Китай)	100 нг/мл 6 ч	↑ TNF-α, MCP-1, IL-6; ↓ IL-10	Не изменилась	4-гидроксиизолейцин подавлял iRhom2, что приводило к уменьшению воспаления
[38]	MIN6/RAW264.7 Клеточная линия, полученная из β-клеток поджелудочной железы мыши (Университет Осаки, Япония)/Линия мышиных макрофагов	100 нг/мл 36 ч	↑ TNF-α, IL-1β	Не проводился	Деррисфолин А уменьшал воспаление за счёт индукции регукальцина — белка клеточной защиты
[39]	Кардиомиоциты совместно с фибробластами и т.п. Человеческие ИПСК из биоптатов кожи и образцов крови	1 мкг/мл 6 ч	↑ IL-6	Не проводился	Антагонист TRPV1 капсазепин снижал продукцию IL-6

Примечание: ММСК — мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, ИПСК — индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, ЛПС — липополисахарид, ЦОГ-2 — циклооксигеназа-2.

 

Липополисахарид-индуцированное воспаление на культуре моноцитов THP-1 воссоздано в работе X.G. Zou с соавт. [21]: доказательством наличия воспалительного ответа стало повышение уровня TNF-α, IL-1β и IL-6, что было обусловлено увеличением активности циклооксигеназы-2 и сигнального пути NF-κB. На культуре этих клеток также изучали толерантность к эндотоксину путём повторной стимуляции ЛПС. F. Ishikawa и соавт. [22] обнаружили, что после повторной обработки клеток воспалительным агентом снижалась концентрация TNF-α, что свидетельствовало о формировании толерантности к ЛПС.

Важные результаты были получены Q. Meng с соавт. [23], которые установили, что ЛПС-индуцированное воспаление, вызванное на культурах различных макрофагов, связано с метаболическими нарушениями, так как наряду с усиленным продуцированием IL-1β, IL-6 и TNF-α отмечалась активация гликолиза.

Увеличение количества воспалительных заболеваний дыхательной системы, в том числе вирусных респираторных инфекций, делает актуальным изучение механизмов развития воспаления на культурах клеток, полученных из тканей органов дыхания. В работе O.J. Sul и S.W. Ra [24] для создания ЛПС-индуцированной модели воспаления использовали линию клеток рака лёгкого человека A549 и обнаружили увеличение продукции провоспалительных цитокинов (TNF-α и IL-6) и повышение уровня их мРНК, что авторы объяснили не только запуском сигнального пути NF-κB, но и окислительным стрессом. Представление о воспалительном процессе в лёгочной ткани было расширено благодаря исследованию J. Sun с соавт. [25], установившими, что важным звеном патологического процесса при воздействии ЛПС на клетки MRC-5 (фетальные фибробласты лёгких человека) служит активация циркулярных РНК, участвующих в синтезе различных белков, в частности белка circAtp9b, активация которого привела к подавлению экспрессии мРНК miR-27a. Это сопровождалось запуском сигнальных путей NF-κB и JNK и провоспалительной секрецией клеток.

J.W. Wang с соавт. [26] стимулировали воспалительный ответ в культуре клеток CaСo-2, моделируя воспалительное заболевание кишечника. Повышение уровня продукции медиаторов воспаления происходило на фоне активации сигнальных систем NF-κB и JAK/STAT, что позволяет предполагать, что запуск этих систем является общим для развития воспалительного процесса.

Индукцию воспаления в почечной ткани изучали D. Han с коллегами [27]: авторы показали, что клетки HK2 отвечают на воздействие ЛПС повышенной продукцией воспалительных цитокинов, что было связано в том числе с активацией экспрессии NKILA (длинной некодирующей РНК (lncRNA), взаимодействующей с NF-κB), которая приводила к повышению уровня апоптоза.

В экспериментах Y. Zhang с соавт. [28] изучали воспалительный ответ путём воздействия ЛПС на культуру микроглиальных клеток HAPI, в результате чего увеличилась концентрация PGE2 и TNF-α. Далее исследователи обработали клеточную культуру SH-SY5Y (линия клеток нейробластомы человека) кондиционированной средой после культивирования микроглии, что привело к снижению жизнеспособности этих клеток. Таким образом была создана модель нейровоспаления, где ведущая роль отводится микроглии [28]. Подобные работы (с учётом неспецифичности развёртывания воспалительного процесса) приобретают большую ценность для формирования цельной картины нейровоспаления при новой коронавирусной инфекции [40].

Многие нарушения в организме, в том числе и при ряде актуальных вирусных заболеваний, связаны с поражением эндотелия сосудов. M. Li с соавт. [29] моделировали такой патологический процесс на фоне воспаления и показали, что воздействие ЛПС на культуру эндотелиоцитов HUVEC привело к усилению апоптоза и снижению количества жизнеспособных клеток на фоне повышенной продукции IL-6 и IL-8.

ЛИПОПОЛИСАХАРИД-ИНДУЦИРОВАННОЕ ВОСПАЛЕНИЕ В СМЕШАННЫХ КУЛЬТУРАХ

Сокультивирование различных клеток и проведение исследований на них даёт широкие возможности для выявления механизмов развития воспалительного ответа на тканевом уровне, где взаимодействия между различными пулами клеток могут приводить либо к усилению процессов воспаления, либо, наоборот, к ослаблению. Такой подход позволяет устанавливать про- или противовоспалительную роль некоторых клеток и их взаимоотношения при реализации процессов воспаления.

Для установления провоспалительной активности макрофагов, играющих важную роль в развитии хронической обструктивной болезни лёгких, была проведена ЛПС-обработка клеток A549 (альвеолярные эпителиоциты) и THP-1 (макрофаги), что вызвало при их совместном культивировании усиленный воспалительный ответ, степень проявления которого прямо пропорционально зависела от дозы ЛПС и времени его воздействия [30]. В работе B. Drasler с соавт. [32] для оценки участия иммунных клеток в воспалении сокультивировали клетки A549, макрофаги и дендритные клетки, полученные из моноцитов периферической крови. Использование ЛПС в этой модели привело к повышенной секреции провоспалительных медиаторов, таких как IL-8, IL-1β и TNF-α, повышенной экспрессии их генов и провоспалительной поляризации исследуемых макрофагов (M1-фенотип) [31].

S. Leisengang с соавт. [32] провели стимуляцию с помощью ЛПС комбинированной культуры клеток задних рогов спинного мозга, содержащей нейроны и глиальные клетки, и мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) жировой ткани и установили, что данные клетки благодаря своим модулирующим свойствам вызвали снижение провоспалительной активности в культуре клеток спинного мозга, выраженное в уменьшении продукции IL-6 и TNF-α. Для более точной имитации нейровоспаления N. Goshi с соавт. [33] совместно культивировали нейроны, микроглиальные клетки и астроциты: прекондиционирование данных клеток в среде с ЛПС привело к усиленному выбросу TNF-α, IL-1α, IL-1β и IL-6, что связывают с ответом микроглиальных клеток на воздействие ЛПС [33]. Кроме того, наблюдалось увеличение размеров площади, занимаемой астроцитами и микроглией, на фоне повышенной проапоптотической активности.

Противовоспалительные свойства ММСК, полученных из бычьей жировой ткани, были также продемонстрированы при их сокультивировании с эпителиальными клетками эндометрия крупного рогатого скота на фоне воздействия ЛПС: уровни медиаторов воспаления и апоптоза заметно снижались, что объяснялось подавлением сигнальных путей систем JAK и MAPK [34].

Систему совместного культивирования клеток BV2 (линия микроглиальных клеток мыши) и 661W (линия колбочковых фоторецепторов мыши) использовали J. Zhang с соавт. [35] для моделирования ретинита, стимулируя клетки BV2 перед сокультивированием ЛПС. Наблюдаемое повышение уровня TNF-α, IL-1β и IL-6 было связано с подавлением некодирующей микроРНК miR-146a, что приводило к увеличению продукции фактора транскрипции Nr4a3, ответственного за активацию провоспалительных цитокинов, и этот эффект был подтверждён с помощью экзосом ММСК, которые оказывали противовоспалительный эффект, стимулируя miR-146a и подавляя Nr4a3.

Как отмечалось ранее, важную роль в воспалении играет эндотелий сосудов. Y. Bian с соавт. [36] создали ЛПС-индуцированную модель воспаления в сокультуре клеток CaCo-2 и клеток MIMVEC (эндотелиоциты микроциркуляторных сосудов кишечника мыши). В результате воздействия патогена нарушалась проницаемость слоя клеток CaCo-2, нарастала концентрация IL-8, активировалась система NF-κB, что свидетельствовало о связи возникающих нарушений с утратой барьерной функции.

Поскольку распространённость ожирения в наше время высока, важны исследования, которые изучают механизмы воспаления, формирующегося при избыточном весе. C. Zhou с соавт. [37] рассматривали эффекты влияния ЛПС на совместную культуру адипоцитов, дифференцированных из клеток 3T3-L1 (линия фибробластов), и макрофагов RAW264.7 и обнаружили, что концентрация TNF-α, моноцитарного хемоаттрактантного белка 1 (MCP-1) и IL-6 повышалась, а IL-10, наоборот, снижалась [37]. При этом отмечалась преимущественная M1-поляризация макрофагов и активация некаталитической внутримембранной ромбоидной протеазы-2 (iRhom2), играющей важную роль в секреции TNF-α.

Не только ожирение, но и сахарный диабет 2-го типа сопровождается воспалительными реакциями. Так, стимуляция ЛПС сокультивированных β-клеток MIN6 и макрофагов RAW264.7 приводила к значительному повышению уровня продуцируемых провоспалительных цитокинов на фоне высокого уровня перекисного окисления липидов и апоптоза, и усиленная воспалительная реакция была обусловлена паракринными эффектами макрофагов [38].

K. Sattler с соавт. [39] использовали в качестве мишени кардиомиоциты, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) человека. Смоделировав воспалительный миокардит (культура кардиомиоцитов, полученных из ИПСК, также содержала фибробласты и другие клетки) с помощью ЛПС, авторы доказали, что в развитии патологического процесса играет роль неселективный канал переменного рецепторного потенциала ваниллоидного ряда 1 (TRPV1).

ОБСУЖДЕНИЕ

Проведённый анализ литературных данных по ЛПС-индуцированной модели воспаления подтвердил, что в основе развития воспалительного процесса лежит активация классических сигнальных путей NF-κB, MAPK и JAK/STAT. При этом некоторые исследования раскрывают участие других молекулярных механизмов в патогенезе воспаления: влияние некодирующих и циркулярных РНК, роль белка iRhom2 и TRPV1, паракринные эффекты клеток иммунной системы и т.д. (рис. 1).

 

Рис. 1. Схема механизмов развития липополисахарид-индуцированного воспаления в различных моделях исследований in vitro.

 

Подробная оценка ЛПС-индуцированной модели по результатам обзора представлена в табл. 1.

Важный критерий для подтверждения воспалительного ответа — повышенная продукция провоспалительных цитокинов. Большинство исследователей методом иммуноферментного анализа определяли концентрацию таких цитокинов, как TNF-α, IL-1β и IL-6, что можно предложить в качестве стандарта, характеризующего рабочую модель воспаления. Хорошим дополнением является также изучение экспрессии генов данных веществ методом полимеразной цепной реакции. Доза воспалительного агента (ЛПС) и время его воздействия в проанализированных работах были различны, что можно объяснить отличающимся токсическим действием на разные типы клеток, поэтому подбор дозы ЛПС и времени обработки должен происходить путём предварительного изучения влияния разных концентраций патогена на жизнеспособность применяемых клеточных культур. Чаще всего стимуляция воспаления происходила при концентрациях ЛПС 100 нг/мл и 1 мкг/мл в течение 6 и 24 ч. Следует учитывать, что применение культур макрофагов и моноцитов позволяет получить выраженную провоспалительную активность, что объясняется их M1-поляризацией, обусловленной воздействием ЛПС на TLR4 [41]. Комбинирование различных культур клеток для моделирования воспаления приближает картину воспалительного ответа к той, которая наблюдается в живом организме, что делает такие исследования более полноценными. Однако возможно негативное влияние разных типов клеток друг на друга, что ограничивает проведение работ по сокультивированию. Кроме того, такие эксперименты сопровождаются дополнительными финансовыми затратами на специализированные среды, системы совместного культивирования и т.д.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Липополисахарид-индуцированная модель воспаления служит удобным инструментом для воспроизведения контролируемых условий патологического процесса in vitro, особенно для культур моноцитов и макрофагов, учитывая их повышенный провоспалительный ответ. Данная модель дает возможность для in vitro исследований по подбору тактики противовоспалительной фармакологической терапии. Несмотря на хороший научный потенциал, все ещё остаются сложности при воспроизведении липополисахарид-индуцированной модели воспаления в случае сокультивирования разных клеточных культур, а также при подборе дозы и времени обработки липополисахаридов. Решение этих проблем является одной из перспективных задач.

ДОПОЛНИТЕЛЬНО

Источник финансирования. Не указан.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Вклад авторов. Все авторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям ICMJE (все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией).

Об авторах

Алтынбек Азраткулович Ислаев

Институт биомедицинских исследований — филиал Владикавказского научного центра РАН

Email: romesh_k@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-7800-8593
SPIN-код: 6435-1072
Россия, Владикавказ

Тамара Тамерлановна Чибирова

Институт биомедицинских исследований — филиал Владикавказского научного центра РАН

Email: romesh_k@mail.ru
SPIN-код: 2736-0620
Россия, Владикавказ

Елена Астановна Такоева

Институт биомедицинских исследований — филиал Владикавказского научного центра РАН

Email: romesh_k@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7248-5244
SPIN-код: 8641-7827

к.м.н.

Россия, Владикавказ

Ромеш Иванович Кокаев

Институт биомедицинских исследований — филиал Владикавказского научного центра РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: romesh_k@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2326-1348
SPIN-код: 5918-9041

к.м.н., доцент

Россия, Владикавказ

Список литературы

Дополнительные файлы