Экспрессия Thy-1 [CD90] антигена на периферических стволовых [CD34+] гемопоэтических клетках

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Целью данного исследования явилась характеристика популяции ранних стволовых кроветворных клеток на основании экспрессии Thy-1 антигена на мобилизованных CD34+ клетках. Методом проточной цитофлуориметрии, с применением прямых флуорохромных конъюгатов моноклональных антител и с использованием двойной и тройной флуоресцентной метки охарактеризованы субпопуляции стволовой кроветворной клетки. Оценено 40 образцов продуктов афереза, полученных у 35 онкологических больных в ходе стимуляции кроветворения и сбора трансплантируемой кроветворной ткани. В большинстве случаев стволовые кроветворные клетки экспрессировали CD90 слабо и только в отдельных образцах это была отчетливая дискретная клеточная популяция. В целом пул стволовых кроветворных клеток в образцах, изученных нами, был мономорфен по экспрессии антигенов HLA-DR, CD38, CD45, преобладали миелоиднокоммитированные предшественники (CD13+, CD33+).

Средние уровни экспрессии Thy-1 антигена в исследовании составили 18,5±3,3% в пределах CD34+ клеток. Отдельные образцы демонстрировали значительную пропорцию Thy-1+CD34+ клеток (более 50,0%). Значимых корреляций количества CD9O+CD34+кпеток с числом стволовых клеток, экспрессирующих антигены HLA-DR, CD38, CD117, нами не получено. Установлена связь между процентным содержанием стволовых клеток, экспрессирующих Thy-1, и следующими субпопуляциями клеток CD34+CD33+(р=0,037), CD34+CD71+ (р=0,009), CD34+CD19+ (р=0,029). Данные указывают на гетерогенность иммунологического фенотипа Thy-1 + мобилизованных стволовых кроветворных клеток и возможность присутствия выраженной пропорции CD34+CD90+ клеток в трансплантируемой ткани.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Л. Ю. Гривцова

ГУ Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН

Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com

Лаборатория иммунологии гемопоэза, отдел клинической иммунологии НИИ клинической онкологии

Россия, Москва

Н. Н. Тупицын

ГУ Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН

Email: info@eco-vector.com

Лаборатория иммунологии гемопоэза, отдел клинической иммунологии НИИ клинической онкологии

Россия, Москва

Список литературы

  1. Civin C.I., Strauss L.C., Brovall C. et al. Antigenic analysis of haematopoiesis III. A haematopoietic progenitor cell surface antigen defined by monoclonal antibody reside against KG-1 cells. J. Immunol. 1984; 133: 157-б5.
  2. Siena S., Bregni M., Brando B. et.al. Flow cytometry for clinical estimation of circulating hematopoietic progenitors for autologous transplantation in cancer patients. Blood 1991; 77: 400-9.
  3. Zimmerman T.M., Lee W.J., Bender J.G. et al. Quantitative CD34+ analysis may be used to guide peripheral blood stem cell harvest. Bone Marrow Transplant. 1995; 9: 439-44.
  4. Bender J.G., To L.B., Williams S. et al. Defining a therapeutic dose of peripheral blood stem cells. J. Hematother. 1992; 1:329-41.
  5. Sutherland D.R., Anderson L., Keeney M. et al. The ISHAGE guidelines for CD34+ cell determination by flow cytometryJ. Haematother. 1996; 5: 213-26.
  6. Krause D.S., Fackler M.J., Civin C.I. CD34: structure, biology and clinical utility. Blood 1996; 87: 1-13.
  7. Brecher M.E., Sims L., Schmitz J. et al. North American Multicenter study on flow cytometric enumeration of CD34+ hematopoietic cells. J. Hematother. 1996; 5:227-36.
  8. Baech J., Johnsen N.E. Technical aspects and clinical impact of hematopoietic progenitor subset quantification. Stem cells, 2000; 18:76-86.
  9. Bender J.G., Unverzagt K.L., Walker D.E. et al. Identification and comprasion of CD34-positive cells and thier subpopulation from normal peripheral blood and bone marrow using multicolor flow cytometry. Blood 1991; 77: 2122-6.
  10. Andreeva L.Yu., Tupitsyn N.N. Tissue Antigen, the 7-th Workshop and Conference on HLDA-7; 2000: 55(1): 96.
  11. Pierelli L., Teofili L., Menichella G. et al. Further investigations on the expression on HLA-DR, CD33 and CD13 surface antigens in purified bone marrow and peripheral blood CD34+ haematopoietic progenitor cells. Br. J. Haematol. 1994; 84: 24-30.
  12. Андреева Л.Ю., Тупицын H.H. Субпопуляции периферических стволовых гемопоэтических клеток (ПСГК): Проточно-цитофлуориметрическая

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис.0

Скачать (385KB)
3. Рис. 1. Цитограммы, полученные с помощью проточной цитофлуориметрии. Выбор анализируемого гейта при характеристике субпопуляций стволовых клеток. А - Изотипический контроль, определяющий уровни неспецифического связывания. По оси X - экспрессия IgGI, по оси Y - гранулярность клеток; В - отражает правильность выбора гейта для сбора CD34+ клеток. По оси X - уровни экспрессии CD34 антигена, по оси Y - гранулярность клеток. Все CD34+ клетки включены в гейт R1 ; С - окончательный образец сбора стволовых клеток. Параметры те же, что и в цитограмме В, только набор клеточных событий осуществлен в гейте R1, включающем стволовые клетки (гейт R2) и незначительную примесь гранулоцитов (фон). Дальнейший анализ субпопуляций выполняется исключительно в гейте R2, то есть среди CD34+ клеток

Скачать (29KB)
4. Рис. 2. Экспрессия CD90 на стволовых кроветворных (CD34+) клетках. А - Присутствие дискретной фракции CD90+CD34+ клеток в цитаферезном продукте. Анализ осуществлен в пределах только CD34+ клеток. По оси ординат - CD34+ клетки, по оси абсцисс - экспрессия CD90 на стволовых CD34+ клетках (область R2 -CD34+CD90+, клетки зеленого цвета]. Хорошо видно, что Thy-1- позитивные клетки - это отдельная фракция среди CD34+ клеток; B - присутствие значительной пропорции стволовых клеток, слабо экспрессирующих Thy-1 антиген в цитаферезном продукте. Анализ в гейте стволовых клеток (на рисунке - только CD34+ клетки]. По оси ординат -CD34+ клетки, по оси абсцисс - экспрессия Thy-1 антигена, 59,6% стволовых клеток коэкспрессируют CD90 в данном цитаферезном продукте (верхний правый квадрант, процент Thy-1 клеток приведен за вычетом процента клеток в изотипическом контроле, который составил 0,5%)

Скачать (51KB)
5. Рис. 3. Параметры светорассеяния Thy-1 -позитивных стволовых клеток. По оси ординат - параметр SSC, определяющий гранулярность клеток. По оси абсцисс - параметр FSC, определяющий размер клеток. На рисунке представлены только СО34+клетки, зеленым цветом выделена субпопуляция CD90+CD34+, для большинства клеток которой показатель FSC имеет более низкие уровни по сравнению с остальными стволовыми кроветворными клетками (выделены красным цветом). В данном цитаферезном продукте количество CD34+CD90+ клеток составило 27,0%

Скачать (28KB)

© Эко-Вектор, 2023



СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: 

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах