Анализ экспрессии рекомбинантного гена vegfгенетически модифицированными мононуклеарнымиклетками пуповинной крови в эксперименте in vivo
- Авторы: Мухамедшина ЯО1,2,3, Соловьева ВВ1,2,3, Салафутдинов ИИ1,2,3, Черенкова ЕЕ1,2,3, Федотова ВЮ1,2,3, Сафиуллов ЗЗ1,2,3, Измайлов АА1,2,3, Шарифуллина ГА1,2,3, Абдулхаков СР1,2,3, Калигин МС1,2,3, Баширов ФВ1,2,3, Мухамедьяров МА1,2,3, Шмаров ММ1,2,3, Народицкий БС1,2,3, Киясов АП1,2,3, Ризванов АА1,2,3, Исламов РР1,2,3, Mukhamedshina YO3, Solovieva VV3, Salafutdinov II3, Cherenkova EE3, Fedotova VY3, Safiullov ZZ3, Izmailov AA3, Sharifullina GA3, Abdulhakov SR3, Kaligin MS3, Bashirov FV3, Muhamediarov MA3, Shmarov MM3, Naroditskii BS3, Kiiasov AP3, Rizvanov AA3, Islamov RR3
-
Учреждения:
- Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань
- Казанский государственный медицинский университет, Казань
- Выпуск: Том 7, № 3 (2012)
- Страницы: 130-134
- Раздел: Статьи
- Статья получена: 11.01.2023
- Статья опубликована: 15.09.2012
- URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/121636
- DOI: https://doi.org/10.23868/gc121636
- ID: 121636
Цитировать
Полный текст
![Открытый доступ](https://genescells.ru/lib/pkp/templates/images/icons/text_open.png)
![Доступ закрыт](https://genescells.ru/lib/pkp/templates/images/icons/text_unlock.png)
![Доступ закрыт](https://genescells.ru/lib/pkp/templates/images/icons/text_lock.png)
Аннотация
клетки должны обладать повышенной способностью к выживанию и активной экспрессией терапевтического гена.
В настоящей работе с помощью иммунофлуоресцентного
окрашивания нами была исследована функциональная
активность генно-клеточной конструкции для доставки терапевтического гена в область регенерации. В качестве
модели использовали трансгенных SOD1-G93A мышей с
фенотипом бокового амиотрофического склероза, которым
проводили ксенотрансплантацию мононуклеарных клеток
пуповинной крови человека, генетически модифицированных экспрессионными аденовирусными векторами, кодирующими сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF) и
репортерный зеленый флуоресцентный белок (EGFP).
Результаты исследования позволили установить не
только продолжительность выживания трансплантированных клеток, но и эффективность экспрессии рекомбинантного гена в генетически модифицированных клетках in vivo.
Двойное иммунофлуоресцентное окрашивание при помощи
антител к ядерному антигену человека HNА и сосудистому
эндотелиальному фактору роста VEGF обнаружило HNА+/VEGF+ клетки на терминальной стадии заболевания, через
15 нед. после трансплантации. Полученные данные свидетельствуют, что генетически модифицированные мононуклеарные клетки пуповинной крови, трансплантированные
трансгенным SOD1-G93A мышам, способны проникать через гематоэнцефалический барьер, мигрировать в область
дегенерации нервной ткани и сохранять жизнеспособность
от момента трансплантации до смерти животных в терминальной стадии заболевания. При этом экспрессионный
вектор на основе аденовируса, содержащего терапевтический ген, активно функционирует в трансплантированных
клетках, а секреторный продукт рекомбинантного гена воздействует на клетки-мишени по паракринному механизму.
Об авторах
Я О Мухамедшина
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
В В Соловьева
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
И И Салафутдинов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
Е Е Черенкова
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
В Ю Федотова
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
З З Сафиуллов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
А А Измайлов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
Г А Шарифуллина
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
С Р Абдулхаков
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
М С Калигин
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
Ф В Баширов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
М А Мухамедьяров
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
М М Шмаров
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
Б С Народицкий
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
А П Киясов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
А А Ризванов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
Р Р Исламов
Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань;Казанский государственный медицинский университет, Казань;
Y O Mukhamedshina
V V Solovieva
I I Salafutdinov
E E Cherenkova
V Y Fedotova
Z Z Safiullov
A A Izmailov
G A Sharifullina
S R Abdulhakov
M S Kaligin
F V Bashirov
M A Muhamediarov
M M Shmarov
B S Naroditskii
A P Kiiasov
A A Rizvanov
R R Islamov
Список литературы
- Fuss I.J., Kanof M.E., Smith P.D. et al. Isolation of whole mononuclear cells from peripheral blood and cord blood. Curr Protoc Immunol. 2009; Chapter 7: Unit 7.1.
- Завалишин И.А., Бочков Н.П., Суетна З.А. и др. Генная тера- пия бокового амиотрофического склероза. Бюллетень эксперимен- тальной биологии и медицины 2008; 145(4): 467-70.
- Yang W.Z., Zhang Y., Wu F. et al. Safety evaluation of allogeneic umbilical cord blood mononuclear cell therapy for degenerative conditions. J. Transl. Med. 2010; 8:75.
- Ma N., Stamm C., Kaminski A. et al., Human cord blood cells induce angiogenesis following myocardial infarction in NOD/scid-mice.Cardiovasc. Res. 2005; 66(1): 45-54.
- Neuhoff S., Moers J., Rieks M. et al. Proliferation, differentiation, and cytokine secretion of human umbilical cord blood-derived mononuclear cells in vitro. Exp. Hematol. 2007; 35(7): 1119-31.
- Vorburger S.A., Hunt K.K. Adenoviral gene therapy. Oncologist 2002; 7(1): 46-59.
- Yan R., Zhang L., Zhang Q. et al. A new finding concerning adenoviral-mediated gene transfer: A high-level, cell-specific transgene expression in the neural stem cells of adult mice. J. Virol. Methods. 2012. Epub ahead of print.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)