Sozdanie protokola napravlennoy differentsirovki indutsirovannykh plyuripotentnykh stvolovykh kletok cheloveka v srednie shipikovye neyrony s vozmozhnost'yu prodolzhitel'nogo kul'tivirovaniya i transgeneza predshestvennikov dannykh kletok
- Авторлар: Grigor'eva E.V1, Malankhanova T.B1, Surumbaeva A.1, Pavlova S.V1, Malakhova A.A1, Zakiyan S.M1
-
Мекемелер:
- Шығарылым: Том 12, № 3 (2017)
- Беттер: 76-76
- Бөлім: Articles
- ##submission.dateSubmitted##: 06.01.2023
- ##submission.datePublished##: 15.09.2017
- URL: https://genescells.ru/2313-1829/article/view/120866
- DOI: https://doi.org/10.23868/gc120866
- ID: 120866
Дәйексөз келтіру
Толық мәтін
Аннотация
Толық мәтін
Средние шипиковые нейроны (СШН) представляют основную массу нейронов стриатума, гибель которых приводит к тяжёлому генетическому нейродегенеративному заболеванию - болезни Хантингтона. Гибель СШН является конечным результатом сложных процессов, вызванных генетической патологией в гене Huntingtin (HTT), а именно, аномальным увеличением (экспансией) тринуклеотидных повторов CAG. Направленная дифференцировка индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) человека в узкоспециализированные типы нейронов даёт возможность изучать in vitro молекулярные механизмы развития нейродегенеративных заболеваний, а также использовать дифференцированные нейроны для тестирования различных химических соединений, являющихся потенциальными лекарственными препаратами. Для таких биомедицинских исследований необходим высокоэффективный, воспроизводимый, простой протокол дифференцировки, позволяющий нарастить в большом количестве узкоспециализированные типы нейральных клеток. Однако существующие протоколы направленной дифференцировки ИПСК в СШН являются долгими, трудоёмкими и дорогостоящими, что значительно затрудняет их использование. В данной работе мы разработали протокол дифференцировки ИПСК в ГАМКэргические СШН, позволяющий продолжительное время культивировать клетки в стадии предшественников СШН, что даёт возможность нарастить в большом количестве клетки, успешно переживающие криоконсервацию и значительно упрощающую использование данного протокола. Более того, нами впервые показано при помощи технологии редактирования генома с использованием CRISPR/Cas9, что предшественники СШН успешно поддаются трансгенезу, что открывает новые перспективы использования СШН с модифицированным геномом в биомедицинских работах.Авторлар туралы
E. Grigor'eva
Email: evlena@bionet.nsc.ru
T. Malankhanova
A. Surumbaeva
S. Pavlova
A. Malakhova
S. Zakiyan