Sekretsiya provospalitel'nykh tsitokinov kletkami, uchastvuyushchimi v regeneratsii kostnoy tkani



Cite item

Full Text

Abstract

Full Text

Повреждение костной ткани инициирует сигнальные каскады, запускающие механизм ее репаративной регенерации (Wang Y. et al., 2018). Мы предполагаем, что продукция провоспалительных цитокинов (IL-1b, IL-6, TNF-а) при остеосинтезе переломов зависит от типа клеток (мо-нонуклеарные лейкоциты крови (МНК); мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (ММСК)) и свойств имплантатов с кальцийфосфатной (КФ) поверхностью. В эксперименте были использованы подложки (10x10x1 мм3) из коммерчески чистого титана, несущих рельефное (индекс шероховатости Ra = 2-5 мкм) КФ покрытие. Выделение МНК проводилось методом центрифугирования на градиенте плотности фиколл-урографин (р= 1,077 г/см3). Клетки (на 98-99% CD45CD3+) и инкубировали в полной питательной среде 48 часов при 37°С, 5% С02 во влажной атмосфере. CD73CD90CD105+ ММСК выделяли из жировой ткани человека (Litvinova L.S. et al., 2018) инкубировали 1 4 суток. Иммунофенотипирование клеток проводили методом проточной цитофлуориметрии (MACSQuant (Miltenyi Biotec, Германия) и анализировали с помощью «KALuZA Analysis Software» (Beckman Coulter, США). Концентрации цитокинов (IL-1b, IL-6, TNF-а; пг/мл) определяли методом проточной флюориметрии (Bio-Plex Protein Assay System, Bio-Rad, США). По истечении времени культивирования в присутствии 3D-матриксов было выявлено увеличение числа МНК с фенотипом CD3CD4CD71+ и резкое увеличение остеогенной дифференцировки ММСК. Число МНК, экспрессирующих маркеры активации (CD25, CD95) и дифференцировки (CD45R0, CD45RA), оставалось на уровне контрольных значений. В культуре МНК уровень провоспалительных цитокинов (IL-1b, IL-6) был повышен в 50 раз (P<0,05) в сравнении с 2D-культурами. Продукция TNF-a увеличилась в 1,5 раза в экспериментальных группах и достоверно отличалась от контрольных значений (P<0,05). ММСК либо не реагировали (IL-1b, IL-6), либо значительно (в 4 раза) снижали (TNF-a) секреторную активность в 3D-культуре. Вывод. Клетками-мишенями, реагирующими на топографию КФ поверхности усилением провоспали-тельной активности в течении первых 1 4 суток, являются Т-лимфоциты, но не ММСК. Увеличение числа CD3CD4CD71 +клеток и концентраций провоспалитель-ных цитокинов способствует инициации сигнального каскада, клиренсу очага повреждения от возможных патогенов и может быть триггером хоминга ММСК в очаг повреждения, что обеспечивает процесс репаративной регенерации костной ткани при остеосинтезе.
×

References

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2019 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: