Vliyanie 3D-matriksov, imitiruyushchikh regeneriruyushchuyu kostnuyu tkan', na differentsirovochnyy potentsial mul'tipotentnykh mezenkhimnykh stromal'nykh kletok



Cite item

Full Text

Abstract

Full Text

Повреждение костной ткани вызывает активацию каскадного механизма регенерации. При проведении остеосинтеза костных переломов с использованием кальций-фосфатных (КФ) материалов медицинского назначения, клиническая эффективность их применения определяется соотношением специфической остеогенной активности и потенциальной токсичности фосфатов кальция, высвобождающихся при биодеградации имплантата. В связи с этим, in vitro исследование поведения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) в присутствии искусственных материалов является важным этапом оценки цитотоксичности и (или) специфической активности имплантатов, предлагаемых к использованию в травматологии и ортопедии. Эксперимент проведен с помощью разработанной модели трехмерного (3D) культивирования клеток in vitro с использованием подложек (10x10x1 мм3) из коммерчески чистого титана с шероховатым (Ra=2-5 мкм) КФ покрытием. Клеточная линия ММСК жировой ткани (ММСК-ЖТ) была получена из липоаспирата человека. Иммунофенотипирование ММСК-ЖТ проводили на проточном цитометре MACS Quant (Miltenyi Biotec, Германия). До начала культивирования число клеток, несущих молекулы CD105, CD73 и CD90 составляло более 95%, клеток, экспрессирующих маркеры CD45, CD34, CD20 и CD14 - менее 4%. Клетки инкубировали в стандартной культуральной среде DMEM/F12 (Gibco Life Technologies, США) в течение 14-21 суток при 37оС, 100% влажности в атмосфере 5% С02. После окончания времени инкубации (1 4 суток) исследование фенотипического профиля культуры CD73CD90CD105+ клеток после 14 дней культивирования не выявило статистически значимых различий при культивирования клеток в присутствии 3D-матриксов. В 2D-культуре на пластике доля живых клеток варьировала в пределах 87-98%. После 14-дневного сокультиви-рования ММСК-ЖТ с 3D-матриксами доля жизнеспособных клеток при окрашивании 0,4% трипановым синим, составила 82-95%. Негативное влияние шероховатости КФ покрытия на выживаемость клеток не установлено. Через 21 сутки в 3D-культуре резко возрастала окраска межклеточного матрикса ализариновым красным, что свидетельствует в пользу дифференцировки ММСК в секретирующие остеобласты. Таким образом, титановые подложки с рельефным КФ покрытием показали полезные остеоиндуктивные свойства при отсутствии цитотоксичности в отношении ММСК, что раскрывает их известную клиническую эффективность при остеосинтезе в случае переломов и заболеваний костной ткани.
×

References

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2019 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: