MSK khoriona cheloveka v usloviyakh in vitro

Abstract

Full Text

Регенеративная медицина с использованием стволовых клеток (СК) человека получает все большее развитие с каждым годом. В своих исследованиях мы обратились к изучению клеток хориона человека. Нами было проанализировано 3 образца клеток, полученных из ФГБУ «Национального медицинского исследовательского центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Министерства Здравоохранения РФ. В системе in vitro все анализируемые клетки характеризовались профилем экспрессии поверхностных CD-маркеров и морфологией, типичной для клеток мезенхимального ряда. На 4-5 пассажах в логарифмической фазе роста регистрировалась заметная доля клеток в фазах синтеза ДНК и митоза, которая снижалась впоследствии при уплотнении культуры. На 6-7 пассажах характер распределения по фазам клеточного цикла изменялся: наблюдалось низкая доля клеток в фазе синтеза ДНК, накопление клеток в фазе G2/M и увеличение доли полиплоидных клеток, с количеством генетического материала > 2n. Оценка пролиферативной активности методами проточной цитометрии и построением кривых клеточного роста показали быстрое снижение про-лиферативной способность всех культур по мере культивирования клеток, что является одним из основных недостатков данного объекта. Клетки хориона активно пролиферируют только 3-4 пассажа, а после 7 пассажа погибают. Такой короткий период активной жизни данных клеток не позволяет нарастить их в количестве, необходимом для использования в терапии. Кариологический анализ показал, что клетки хориона в культуре имеют околодиплоидный кариотип, склонный к поломкам хромосомного материала. Выявленная кариотипическая нестабильность клеток может быть объяснена стрессовым воздействием перевода клеток из системы in vivo в систему in vitro. Подводя итог настоящей работы можно сказать, что проанализированные нами клеточные линии хориона хотя по своим физиологическим характеристикам (морфологии, фенотипическому профилю) относятся к ряду мезенхимальных клеток, мало пригодны в качестве клеточного материала как в медицинских целях, так и в лабораторных исследованиях с длительными экспериментами. Все вышесказанное не умоляет работ по изучению физиологических и генетических характеристик МСК хориона т. к. эти данные могут быть полезны в области гинекологии и неонатологии, в связи с изучением причин неразвивающихся беременностей.