Razrabotka podkhodov k primeneniyu mitoticheski inaktivirovnnykh vaskulyarnykh kletok v regenerativnoy meditsine

Abstract

Full Text

В настоящее время наблюдается рост числа заболеваний с патологией кровеносных сосудов. Различные типы васкулярных эндотелиальных и гладкомышечных клеток используются в качестве модельных систем для изучения ряда заболеваний и считаются перспективным источником для регенеративной медицины. Серьезным препятствием для применения любого типа делящихся клеток в лечении заболеваний человека является риск того, что после введения в организм пациента они могут образовать опухоли. Поэтому важной задачей является исследование возможности использования клеток человека, в которых инактивирована способность к митозу. В этой связи целью данной работы является исследование регенеративного потенциала митотически инактивированных эндотелиальных и гладкомышечных клеток, выделенных из отходного послеоперационного материала кардиальных эксплантов человека. В результате выполнения работы создана методика получения митотически инактивированных паци-ент-специфических васкулярных клеток из материала кардиальных эксплантов человека. Показано, что, несмотря на инактивацию пролиферации, эндотелиальные и гладкомышечные клетки демонстрируют жизнеспособность на уровне более 92%. Полученные клетки сохраняют свои морфофункциональные свойства in vitro: в эндотелиальных клетках сохраняются факторы CD31, vWF и способность нарабатывать компоненты межклеточного матрикса: коллаген 4 типа, фибронектин. Гладкомышечные клетки позитивны по a-актину гладких мышц, тяжелой цепи гладкомышечного миозина, нарабатывают эластин; эндотелиальные клетки также сохраняют способность формировать капилляроподобные структуры в матригеле. Клеточные популяции митоти-чески инактивированных эндотелиальных и гладкомышечных клеток демонстрируют высокий ангиогенный потенциал in vivo на модели иммунодефицитных мышей SCID. В составе тканеинженерных конструкций из поли-капролактона и хитозана клетки сохраняют специфические поверхностные антигены и способность к наработке межклеточного матрикса. Таким образом, митотически инактивированные васкулярные клетки человека потенциально могут быть применены для разработки методов терапевтического ангиогенеза в лечении ишемических поражений, а также для получения клеточно-заселенных тканеинженерных конструкций, пригодных для сосудистой хирургии. Разработанные в ходе реализации проекта методы могут быть применены для создания биомедицинского клеточного продукта.