Reparativnyy neyrogenez v mozzhechke molodi simy oncorhynchus masou posle mekhanicheskogo povrezhdeniya

Abstract

Full Text

Для исследования репаративного нейрогенеза в мозжечке молоди симы были выбраны следующие молекулярные маркёры: для характеристики процессов пролиферации - PCNA и BrdU; глиогенеза и радиальной глии - GFAP и GS , CBS - фермент синтеза сероводорода, нейродифференциации - HuCD. Нестин и виментин использовали для анализа распределения нейрональных клеток-предшественников. TUNEL анализ применялся для идентификации апоптозных элементов с помощью маркирования терминальной деоксинуклеотидил транс-феразы. Путём прокалывания черепа рыбы тонкой иглой наносили рану глубиной в 1 мм в тело мозжечка. После повреждения возрастало число TUNEL+ плотных апоп-тозных телец, представляющих собой финальные стадии крупнозернистой конденсации хроматина и апоптотиче-ской деградации клеток. Число GS+ клеток увеличивалось и мы полагаем, что GS может маркировать как глу-тамат-эргические нейроны, содержащие GS в качестве фермента, метаболизирующего глутамат, так и астроци-топодобные клетки, осуществляющие детоксикацию глу-тамата, захваченного из межклеточного пространства. После повреждения происходила реактивация конститутивных пролиферативных зон с последующей трансформацией в реактивные нейрогенные ниши, содержащие PCNA+, BrdU+, нестин+, виментин+ клетки. Возможно, мелкие клетки-предшественники фенотипически соответствуют популяциям нейрональных стволовых клеток, чья пролиферативная активность значительно увеличивается в случае травмы. Максимальная пролиферативная активность нейрогенных ниш и высокая концентрация CBS+ клеток в этих областях предполагает, что H2S участвует в регуляции пролиферативной активности. В районе нейрогенных ниш выявлялись GFAP+ волокна радиальной глии, в дорсальной матричной зоне (ДМЗ) они формировали разнонаправлено ориентированные пучки. По этим волокнам клетки из активированных нейрогенных ниш и ДМЗ мигрируют к месту нанесения травмы, восстанавливая поврежденную ткань. Наиболее крупным образованием, содержащим пролиферирующие PCNA+, BrdU+, нестин+, виментин+ клетки, была ДМЗ. Вероятно, после повреждения мозжечка зоны пролиферации производят, в основном, HuCD+ нейроны, ускоряется нейрональная дифференциация клеток, которые интегрируются в зрелые нейронные сети. В ходе репаративного нейрогенеза поврежденные клетки уничтожаются путем апоптоза, нейтрализуются эффекты нейровоспаления, начинается активная пролиферация, глиогенез и ускоренная дифференциация новых клеток, которые мигрируют к месту повреждения, восстанавливая ткань.