Otsenka vliyaniya antismyslovogo tiofosfatnogo 5.8SrRNA-11-fragmenta na rost kletochnoy linii kartsinomy cheloveka HEp-2

Abstract

Full Text

Плоскоклеточный рак кожи (эпидермоидная карцинома) занимает одно из лидирующих мест по встречаемости среди новообразований кожи. По данным статистики, за последние десять лет показатели смертности в РФ от рака указанной локализации варьировались от 1,09 до 1,16 на 100 000. Наша исследовательская группа сосредоточилась на создании противокарци-номной мази на основе тиофосфатных антисмысловых олигонуклеотидов для применения в межоперационный период и снижения уровня метастазирования. В качестве мишени для экспериментов с ДНК-лекарством, подавляющим активность клеток эпидермоидной карциномы, была выбрана 5,8S рРНК, играющая ключевую роль в биосинтезе белка. Был разработан антисмысловой фрагмент длиной 11 нт (5'-TGCGTTCGAAG-3', 5.8SrRNA-11-фрагмент), комплементарный участку 5,8S рРНК. В работе была использована клеточная линия HEp-2 эпи-дермоидной карциномы человека (ООО БиолоТ, Россия). Оценка кинетики пролиферативной активности клеточной линии HEp-2 под воздействием 5.8SrRNA-11-фрагмента в концентрации 1000 нг и 2000 нг проводилась на приборе xCELLigence RTCA DP Analyzer (ACEA Biosciences, Inc., США). Клеточная линия HEp-2 была рассажена в лунки планшета прибора плотностью 6,0х103 кл./лунка. Определение клеточного индекса (КИ), как показателя интенсивности роста клеток, выполняли в режиме реального времени в течение 9 часов. Через 4,5 часа наблюдений КИ в контрольной пробе составил 0,52±0,05 у. е., что превысило показатели в опытных пробах на 38,46% (0,32±0,03 у. е., р<0,05, df=14) в группе с концентрацией 1000 нг и на 46,15% (0,28±0,02 у. е., р<0,01, df=14) в группе с концентрацией 2000 нг соответственно. Через 9 часов эксперимента КИ (1,15±0,16 у. е.) в контрольной пробе практически одинаково превышал показатели в экспериментальных пробах с 5.8SrRNA-11-фрагментом в концентрации 1000 нг (0,59±0,07 у. е., р<0,008, df=14) и с 5.8SrRNA-11-фрагментом в концентрации 2000 нг (0,59±0,05 у. е., р<0,007, df=14). Таким образом, в ходе наших исследований было выявлено ингибирующее действие 5.8SrRNA-11-фрагмента на пролиферативную активность клеточной линии HEp-2.