Raznoobrazie GDNF i ego rol' dlya regenerativnoy meditsiny nervnoy sistemy cheloveka

Abstract

Full Text

Отсутствие эффективных форм лечения нейродеге-неративных заболеваний провоцирует исследователей искать новые подходы к терапии, в том числе и с помощью клеточных технологий. Разрабатываются технологии по повышению жизнеспособности нейронов в зоне поражения и стимуляции нейральной дифференцировки прогениторных клеток для восполнения нейронов в области их гибели с помощью трансгенных клеточных культур. GDNF занимает приоритетные позиции для использования в качестве нейропротектора и индуктора нейральной дифференцировки прогениторных/стволовых клеток. Для подобных работ важно понимание, какие изоформы фактора приемлемы для клеточной терапии. Показано, что у человека ген GDNF представлен, по крайней мере, двумя матричными РНК, которые отличаются друг от друга размером pro-области. Исследования позволяют предположить, что один из вариантов GDNF экспрессируется постоянно и необходим для взаимодействия между нервными клетками в норме, другой же (меньший размер pro-области) секретируется и необходим при гибели нейронов для стимуляции восстановительных процессов. Мы показали, что делеция pre -и pro-области в химерном белке GDNF/GFP повышает нейропротекторные свойства фактора. Полученный нами mGDNF/GFP обладал повышенными нейроиндуктрными свойствами, что подтверждено на in vitro моделях эмбриональных спинальных ганглиев крысы и линии РС12. In vivo mGDNF/GFP оказался способен поддерживать жизнеспособность дофаминерги-ческих нейронов при введении в мозг модельных животных с болезнью Паркинсона и значительно защищал их от воздействия пронейротоксина МРТР. При получении трансгенных клеток млекопитающих, продуцирующих mGDNF без GFP было обнаружено, что mGDNF оказался нестабильным. Мы обратили внимание на тот факт, что обнаруживаются несколько повторяемых коротких форм РНК GDNF. Появилась версия, что в ряде случаев в клетках может быть запущен процесс, когда продуктом является не целая форма mGDNF, а в результате альтернативного сплайсинга получаются минифакторы, которые могут продуцироваться при массовой гибели нейронов и могут быть необходимы для восстановления клеточного нейронального пула. Нами были клонированы мажорные мини-последовательности mGDNF и проанализированы на нейроиндукторные свойства. Показано, что один из минифакторов DjGDNF показал способность стимулировать нейрональную дифференцировку прогениторных клеток и может рассматриваться, как перспективный фактор для терапии нейродегенеративных заболеваний.