Immunogistokhimicheskoe issledovanie oreksinergicheskoy sistemy mozga krysy posle ishemicheskogo porazheniya

Abstract

Full Text

Орексины (А и В) или гипокритины - пептиды, которые образуются в нейронах перифорникальной области гипоталамуса в результате ферментативного расщепления молекулы-предшественника - препро-орексина (Sakurai, 1998; de Lecea, et al., 1998). Первоначально функциональное значение орексинов связывали с регуляцией пищевого поведения и энергетического баланса, бодрствования и пробуждения. В настоящее время показано участие этих пептидов в контролировании и других функций мозга, а также широко обсуждается роль орек-синов в эмбриогенезе как факторов морфогенеза (Ito et al., 2008; Bjornstrom, et al., 2014; Bakos, et al., 2016). Цель исследования: оценить иммунореактивность орексина в гипоталамической области рядом с зоной ишемического поражения, которая была определена с помощью МРТ, на третьи сутки после 45 мин. акклюзии сонной артерии у крыс линии Вистар (Shevtsov M.A. et al., 2014; n=5) и после ишемии-репирфузии (n=4). Использованы методы иммуногистохимии (методика с использованием биотин-стрептавидин-диами-нобензидина). На фронтальных срезах мозга крысы, изготовленных с помощью криостата, проведено имму-ногистохимическое исследование с помощью антител мыши против орексина-А (R&Dsystems) и вторичных антител козы против мыши, конъюгированных с биотином (VectorLabs.). На микрофотографиях, полученных с помощью микроскопа Carl Zeiss, проведен количественный анализ иммунопозитивного орексина-А в нейронах и в отростках. После фокальной ишемии рядом с областью поражения выявлено увеличение уровня орексина-А в нейронах (в 2 раза, р<0,05), а также в отростках, локализованных в преоптической области со стороны поражения, непосредственно вокруг пораженного участка коры больших полушарий, а также в области гиппокампа по сравнению с ложнооперированны-ми крысами. После ишемии-репирфузии также отмечено увеличение оптической плотности орексина-А в телах нейронов, локализованных в гипоталамусе, а также и в их отростках, локализованных в различных отделах мозга по сравнению с ложнооперированными животными. Полученные результаты указывают на возможное участие орексинов в процессах репарации, что, очевидно, является проявлением его морфогенетической функции, которая реализуется как в раннем онтогенезе, так и при патологии.