Nemieloablativnaya transplantatsiya kletok kostnogo mozga kak sposob kletochnoy terapii monogennykh zabolevaniy

Abstract

Full Text

Трансплантация миобластов мышам mdx была началом клеточной терапии (КТ) моногенного заболевания (МЗ) миодистрофии Дюшенна (МДД) (Partridge et al., 1989). За 30 лет в поперечно-полосатых мышечных волокнах (ППМВ) при помощи КТ не удалось восстановить синтез дистрофина (СД), сопоставимого по продолжительности с жизнью как больных МДД так и экспериментальных животных. Мы прим.ли внутривенную не-миэлоаблативную трансплантацию (НМАТ) аллогенных клеток костного мозга (ККМ) мышей C57BL/6 мышам mdx (C57BL/10), облученных лучами Рентгена (РО) в дозе 3 Гр, без использования в течение опыта иммуносупрессоров (Соколова и др., 2010; Mikhailov et al., 201 2). Через 6 месяцев (мес) после РО степень химе-ризма мышей mdx, выявленная при помощи трансплантации GFP(+) ККМ C57BL/6, была 3,3±0,8%. СД оценивали иммуноморфологически как долю дистрофин (+) ППМВ (ППМВ(Д+)) в бедренной мышце и диафрагме в течение года после РО. У химер-mdx после РО в дозе 5 Гр и выше усиления СД не наблюдали (Михайлов и др,. 2006). При РО в дозе 3 Гр в бедренной мышце химер-mdx ОД возрастал от 1,1 ±0,4% до 28±7% д(+)ППМВ через 6 мес после трансплантации ККМ и понижался до 5±1% через 12 мес. Доля ППМВ без центральных ядер возрастала от 10±1% до 23±2% на 6 мес и уменьшалась до 11±1% в конце года. При этом доля погибающих ППМВ к концу года уменьшалась от 2,2±0,6% до 0,5±0,1%. В ППМВ диафрагм химер-mdx СД возрастал от 0,3±0,3% до 12±0,4% через 6 мес. и уменьшался до 2,6±0,7% через 9 и до 1,5±0,3% ППМВ(Д+) на 12 мес после трансплантации ККМ. Структуру синапсов оценивали после окраски срезов мышц tetramethylrhodamin-a-bungarotoxin -ом. У химер-mdx доли синапсов «дикого» типа в виде «ветвей» росли от исходных 1 4% до 43%, 49%, 48%, и 37% на 4, 8, 11 и 12 мес после РО и НМАТ ККМ. В синапсах также полностью восстанавливались потенциал покоя и гиперполяризация концевых пластинок (Кравцова и др., 2011). Результаты показывают, что трансплантированные аллогенные ККМ в условиях НМАТ поддерживают СД в мышцах химер-mdx в течение года. НМАТ ККМ успешно используется для лечения МЗ серповидно-клеточной анемии взрослых пациентов (Vermylen, 2013). Обсуждается перспективость применения метода немиэлоаблативной трансплантации ККМ для лечения МДД и других моногенных заболеваний.