INTERACTION OF BECLIN-1 AND BECLIN-2 IN GLIOBLASTOMA CELLS DURING TUMOR PROGRESSION AND RESPONSE TO THERAPY

Abstract

Full Text

Глиобластома считается наиболее агрессивной и часто встречающейся раковой опухолью головного мозга. Несмотря на своевременную и максимально возможную терапию опухоль обычно рецидивирует. Аутофагия значима в формировании вторичных рецидивов глиобласто-мы, а также является одним из типов клеточной смерти, вызываемой темозоломидом. Важную роль в регуляции аутофагии играют белки-паралоги Beclin1 и Beclin2. Экспрессия генов BECN1 и BECN2 напрямую регулируют процессы, связанные с аутофагией внутри клетки. Высокий уровень экспрессии BECN1 способствует положительному ответу на лечение дифференцированной глиобластомы темозоломидом. Beclin1 , основной регулирующий фактор аутофагии, отвечает за нуклеацию аутофагосом, посредством связывания с PI3KC3. Благодаря схожему с Beclin1 строению и наличию домена CCD Beclin2 способен связываться с комплексом PI3KC3, а также с другими белками, регулирующими аутофагию и непосредственно с самим Beclin 1. Функции, которые при этом выполняет Beclin2 аналогичны, но отличаются в деталях. Так же Beclin2 является регулятором апоптоза. Ранее было проведено иммуногистохимическое исследование уровня Beclin1 в образцах первичной гли-областомы с различной степенью злокачественности в сравнении с нормальной тканью головного мозга. Мы провели аналогичное исследование для Beclin2 и получили схожие результаты: в раковых клетках при второй и четвертой степенях злокачественности уровни Beclin1 и Beclin2 гораздо выше в сравнении с нормальной тканью головного мозга. Для определения базального уровня Beclin2, мы провели вестерн блот клеток глиобластомы линии U87 в присутствии темозоломида. Нами показано, что уровень Beclin2 падает при лечении клеток темозоломи-дом и с ростом его концентрации. Эти данные имеют обратную корреляцию с аналогичными для Beclin1. Далее мы провели вестерн блот анализ лизатов клеток глиобластомы U118 линии после их трансфекции антисмысловой РНК к Beclin1. Результаты показали, что уровень Beclin2 ассоциировано падает. Исходя из вышесказанного можно утверждать о взаимосвязи между уровнями этих белков и то, что их взаимодействие в первичной ткани глиобластомы и при лечении темозоломидом отличны. Нам предстоит проверить, как клетки реагируют на терапию темозоломидом при повышенной экспрессии генов BECN1 и BECN2, исходя из взаимного взаимодействия их белков друг на друга.