ASSESSMENT OF THE AGGREGATION ABILITIES OF RIBOSOMAL PROTEINS

Abstract

Full Text

Амилоиды - белковые агрегаты фибриллярной природы, формирующие межмолекулярные кросс-13-структуры, связанные с более чем 50 заболеваниями (амилоидозами), среди которых наиболее социально значимыми являются такие как болезни Альцгеймера и Паркинсона и диабет II типа. В последние годы появляется всё больше данных о так называемых функциональных амилоидах, выполняющих важные биологические функции, такие как регуляция долговременной памяти, участие в полимеризации меланина, хранение пептидных гормонов и др. Несмотря на то, что амилоиды активно изучаются, имеющиеся о них данные носят разрозненный характер и не позволяют в полной мере оценить распространённость и значимость амилоидов в живой природе, в том числе у человека. В рамках данного проекта, мы идентифицируем новые амилоидогенные белки и изучаем биологическую роль амилоидогенеза в жизнедеятельности организмов. Разработанная ранее дрожжевая тест-система позволяет проводить масштабный поиск амилоидных белков в протеомах различных организмов, включая и человека [1]. Для такого анализа нами была получена библиотека химерных генов, пригодная для экспрессии в клетках дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Библиотека включает последовательности кДНК человека, слитые с прионным доменом дрожжевого белка Sup35N. Прионный домен дрожжевого белка не формирует амилоид самостоятельно в отсутствие предсуще-ствующих амилоидов. Слияние с амилоидогенным белком человека приводит к образованию фенотипически детектируемого амилоида. Первичный скрининг выявил ряд белков человека, потенциально обладающих амилоидными свойствами, включая несколько рибосомальных белков. Поскольку рибосомальные белки представляют собой эволюционно древние белки, в норме продуцируемые в стехиометрических соотношениях и включённые в высокомолекулярные комплексы, их способность к агрегации может быть связана с биологическими регуляторными механизмами. Представленные в работе данные посвящены дальнейшему анализу агрегационных свойств рибосомаль-ных белков человека с использованием генетических, биохимических и цитологических методов.