Nanochastitsy serebra snizhayut sekretsiyu rostovykh faktorov v adgeziruyushchikh trombotsitakh

Abstract

Full Text

Цель. Оценить сохранность ростовых факторов в ад-гезирующих тромбоцитах в присутствии наночастиц серебра. Материалы и методы. В работе использовали богатую тромбоцитами плазму (БоТП), выделенную из крови доноров-добровольцев. Образцы БоТП аликвотировали в 4 пластиковые пробирки по 500 мкл, в 3 из них добавляли наносеребро в концентрации 1,25, 2,5 и 5 мкМ соответственно для стабилизации тромбоцитарных гранул (опытные образцы), четвертую оставляли без наночастиц в качестве контроля. Контрольные и опытные образцы БоТП наносили на коллагеновые повязки и инкубировали в течение 30 мин. при 37°С для стимуляции массовой адгезии тромбоцитов. Затем из контрольных и опытных образцов отбирали жидкую фракцию и центрифугировали ее при 3000 g для удаления клеточных фрагментов. В полученном надосадке определяли содержание фактора роста эндотелия сосудов VEGF, эпидермального фактора роста EGF, трансформирующего фактора роста TGF-a, тромбоцитарного фактора роста PDGF в пг/ мл с помощью мультиплексного анализа на платформе Luminex 200. Сохранность ростовых факторов в кол-лагеновых повязках оценивали по степени снижения их концентрации (в %) в опытных и контрольных образцах по сравнению с исходной БоТП. Для оценки различий использовали U-критерий Манна-Уитни. Различия значений считали достоверными при р<0,05. Результаты. В лизате исходной БоТП уровень VEGF составил в среднем 1242, EGF - 292, TGF-a - 14, PDGF - 1263 пг/мл. После адгезии тромбоцитов на кол-лагеновых повязках содержание данных факторов в на-досадке контрольных образцов значимо не отличалось от исходных значений (р>0,05). Таким образом, в отсутствие наносеребра адгезирующие тромбоциты выделяли в плазму весь объем содержащихся в них ростовых факторов. В опытных образцах сохранность факторов в тромбоцитах была неодинаковой при разных дозах наносеребра.По сравнению с исходными значениями в надосадке БоТП концентрации EGF и VEGF были снижены при 1,25 мкМ наносеребра на 43% и 61%, при 2,5 мкМ - на 30 и 54%, соответственно (р<0,05). Наибольшее снижение концентраций PDGF и TGF-a отмечено при 2,5 мкМ наносеребра, составляя соответственно 40 и 74% (р<0,05). Выводы. Наночастицы серебра позволяют сохранить ростовые факторы в составе адгезирующих тромбоцитов. Для стабилизации EGF и VEGF наиболее эффективна концентрация наносеребра 1,25 мкМ, для стабилизации PDGF и TGF-a - 2,5 мкМ. Стабилизация тромбоцитов с помощью наносеребра может быть использована при создании тромбоцит-насыщенных трансплантатов.