STUDY ON THE AGGREGATION OF PHC3 PROTEIN IN MICROBIAL AND HUMAN CELLS

Abstract

Full Text

Амилоиды - упорядоченные белковые агрегаты фибриллярной природы, которые формируются за счет образования межмолекулярных кросс-бета структур. Особый интерес к амилоидам связан с тем, что они ассоциированы с целым рядом неизлечимых заболеваний человека, наиболее известными из которых являются болезни Альцгеймера и Паркинсона, диабет II типа, прион-ные заболевания. Наряду с патогенными амилоидными белками, в последние годы появляется все больше данных о функциональных амилоидах, которые выполняют важные биологические функции у различных организмов В ходе исследований, проведённых с использованием оригинальной дрожжевой тест-системы [1] был выявлен ряд потенциально амилоидогенных белков млекопитающих, включая короткие изоформ 5 и 6 белка PHC3 человека. Амилоидная агрегация коротких изоформ белка PHC3 была подтверждена с помощью биохимических и цитологических методов в клетках дрожжей, а также в бактериальных культурах с использованием системы С-DAG [2]. В ходе данной работы мы показали, что короткие изоформы белка PHC3, слитые с флуоро-фором, формируют детергент-устойчивые цитоплазматические агрегаты при сверхпродукции в культуре клеток человека HEK293T. С использованием РНС3 антител было показано что при агрегации укороченных изоформ, полноразмерный белок PHC3 колокализуется с агрегатами и преимущественно накапливается в цитоплазме. Полноразмерный белок PHC3 является одним из ключевых компонентов поликомб группы (PcG) - комплекса, модулирующего укладку хроматина и необходимого для поддержания репрессированного состояния многих генов, включая Hox-гены во время развития организма. Функции коротких изоформ РНС3 до настоящего времени не были известны. Наши данные указывают, что агрегация коротких изоформ белка PHC3 может сопровождаться секвестрированем в агрегаты его полноразмерной изоформы, что приводит к перемещению части белка РНС3 из ядра в цитоплазму. Мы предполагаем, что это может влиять на активность поликомб комплекса укладку хроматина и уровень экспрессии ряда генов. Таким образом, короткие амилоидогенные изоформы белка РНС3 могут регулировать его биологическую активность. В настоящее время ведутся исследования, направленные на проверку данной гипотезы.