Effekt plazmy bol'nykh troficheskimi yazvami na funktsional'nye svoystva, kletok vovlechennykh v zazhivlenie ran

Abstract

Full Text

Особенностью трофических язв нижних конечностей является склонность к рецидивам, увеличению площади поражения кожных покровов, низкая эффективность традиционных методов лечения, инвалидизация и смертность. Альтернативой традиционному лечению служит использование аутологичных биологически активных компонентов плазмы. Цель исследования изучение влияния лизата тромбоцитов (ЛТ) и обедненной тромбоцитами плазмы (ОТП) больных с трофическими язвами различного генеза на пролиферацию, миграцию, апоптоз и клеточный цикл дермальных фибробластов человека, мезенхимных стволовых клеток и клеток эндотелиальной линии EA.hy 926 in vitro. В исследование включено 7 больных с трофическими язвами на фоне сахарного диабета 2 типа, 7 больных с трофическими язвами венозной этиологии. Лизат тромбоцитов (ЛТ) и обедненную тромбоцитами плазму (ОТП) получали по стандартной методике. Дермальные фибробласты (ДФ), костномозговые мезенхимные стволовые клетки (МСК) получены от доноров, клетки эндотелиальной линии EA.hy 926, любезно предоставлены Dr. C.J. Edgel (Университет Каролины, США). Исследовали пролиферацию всех типов клеток в МТТ-тесте, пролиферацию и миграцию ДФ в режиме реального времени на аппарате xCELLigence System по изменению клеточного импеданса. Клеточный цикл, апоптоз/некроз исследовали на проточном цитофлуориметре по стандартной методике. Показано, что ЛТ и ОТП больных трофическими язвами на фоне сахарного диабета 2 типа (СД2) угнетают пролиферацию ДФ, МСК и EA.hy 926 по данным МТТ-теста. Дополнительное исследование влияния ЛТ и ОТП на пролиферацию ДФ по параметру клеточного импеданса показало, что ОТП больных, особенно на фоне СД2 снижает пролиферативную активность ДФ, а ЛТ, особенно больных без СД2 активирует пролиферацию ДФ. ЛТ и ОТП стимулируют миграционную активность ДФ. ЛТ и ОТП больных трофическими язвами по-разному влияли на клеточный цикл и апоптоз/не-кроз исследуемых клеток. Таким образом, плазма больных с трофическими язвами на фоне сахарного диабета проявляет ингибирующее влияние на функциональную активность дермальных фибробластов человека.