ALGORITHM OF GENETIC EXAMINATION OF PATIENTS WITH ERYTHROCYTOSIS

Abstract

Full Text

Существует алгоритм обследования пациентов с эри-троцитозами разной этиологии, при котором на первом этапе ДНК пациентов исследуют на наличие мутаций в 14 и 12 экзонах гена JAK2 с целью исключения такого клонального заболевания, как хроническое миелопро-лиферативное заболевания (ХМПЗ). Также в последнее время в литературе встречаются данные о редких случаях выявления мутаций в гене CALR, ассоциированных с ХМПЗ. Вследствие этого ставится вопрос о необходимости проведения анализа мутаций в гене CALR пациентам с эритроцитозами, а также внесением дополнений в алгоритм генетического обследования таких пациентов. Кроме того, для пациентов отрицательных по JAK2 и CALR, у которых отсутствуют мутации, ответственные за развитие клонального заболевания, необходимо проводить исследование в генах белков кислород - чувствительного пути (EPOR, VHL, HIF2a), приводящих к различным типам семейного эритроцитоза. Цель работы - дополнить алгоритм генетического обследования пациентов с эритроцитозом. В исследование были включены образцы ДНК от 38 JAK2 (12 и 14 экзоны)-негативных пациентов с изолированным эритроцитозом, высокими значениями гематокрита и гемоглобина. Качественный анализ мутаций в гене CALR у пациентов с эритроцитозом проводили с использованием разработанной ранее в лаборатории молекулярно- генетических методов исследований СФУ технологии гетеродуплексного анализа с детекцией продуктов амплификации методом электрофореза в вертикальном ПААГ. Исследование на наличие мутаций в генах EPOR, VHL, HIF2a, ответственных за развитие первичного и вторичного эритроцитозов проводили с использованием секвенирования по Сенгеру. На первом этапе работы всем пациентам был проведен анализ на наличие мутаций в гене CALR с целью исключения ХМПЗ. У 1 человека была обнаружена мутация в гене CALR, в совокупности с клиническими данными и результатами морфологического исследования костного мозга был выставлен диагноз ХМПЗ. На втором этапе работы для 37 пациентов был проведен анализ на наличие мутаций в генах EPOR, VHL, HIF2a. Мутации в гене EPOR, ответственного за развитие первичного врожденного эритроцитоза, обнаружены у 2 пациентов, мутации в гене VHL, приводящие к вторичному врожденному эри-троцитозу третьего типа обнаружены у 2 человек, причем у одного из них обнаружена мутация, ассоциированная с Чувашской полицитемией. Мутации в гене HIF2a в 9 эк-зоне, приводящие к вторичному врожденному эритроци-тозу четвертого типа обнаружены у 3 человек. С целью дифференцировки между клональным заболеванием и случаем семейного эритроцитоза для пациентов с эритроцитозами неясной этиологии предлагаем дополнить алгоритм генетического анализа путем проведения исследований в генах белков кислород - чувствительного пути. Использование предложенного дополненного алгоритма позволило уточнить диагноз для 8 из 38 пациентов с эритроцитозами неясной этиологии. Одному из пациентов установлен диагноз ХМПЗ, 7 пациентов имеют различные типы семейных эритроцитозов.