MICA AND MICB GENE EXPRESSION IN CULTIVATED CELL LINES

Abstract

Full Text

Белки семейства MIC (MHC class I chain related proteins) представляют собой высокополиморфные трансмембранные гликопротеины и являются лигандами для килинг-активирующего рецептора NKG2D на мембране NK клеток. В норме MIC белки отсутствуют на поверхности клеток, за исключением эпителия желудка и кишечника, клеток эндотелия, синцитиотрофобласта. Экспрессия этих белков значительно увеличивается при повреждении ДНК, трансформации или инфицировании клеток. Взаимодействие MIC белков с рецептором на мембране NK-клеток играет важную роль в элиминации опухолевых клеток. Под действием металлопротеаз происходит образование растворимой формы MlC белков, что способствует избеганию распознавания опухолевых клеток NK клетками. С помощью моноклональных антител возможно ингибировать процесс образования растворимых MIC белков (de Andrade et al., 2018). Целью данной работы была оценка экспрессии генов белков MICA и MICB в культивируемых клеточных линий опухолей человека. Клетки HepG2 (карцинома печени), CaCo2 (аденокарцинома ободочной кишки), T2 (мультиформная глиома), MeWo (меланома), MCF-7 (карцинома молочной железы), EA.hy926 (клетки эндотелия) культивировали в течение 30 минут при +42оС, через сутки повторно подвергали тепловому шоку (за исключением клеток эндотелия) и затем выделяли тотальную РНК. Методом ПЦР показали, что в опухолевых клетках HepG2, MCF7 и T2 происходила экспрессия обоих генов MICA и MICB. В клетках эндотелия EA.hy926 выявлена только мРНК (кДНК) белка MICA, в клеточных линиях MeWo и CaCo2 обнаружена слабо выраженная экспрессия MICA и MICB соответственно. По данным секвенирования кДНК экстраклеточ-ной части MICA, выделенной из клеток HepG2, соответствовала аллели MICA*008, фрагменты кДНК, полученной из клеток MCF-7, соответствовали аллелям MICA*001 и MICB*005. В европейской популяции аллели MICA*008 и MICB*005 наиболее распространены (Carapito and Bahram, 2015). Опухолевые клеточные линии, подвергнутые воздействию теплового шока, различались по экспрессии генов MIC и обладали различными аллельными вариантами этих белков.