OPISTHORCHIS FELINEUS EXTRACELLULAR VESICLES INCREASE RATE OF MIGRATION AND PROLIFERATION OF HUMAN H69 CHOLANGIOCYTES

Abstract

Full Text

Возбудитель описторхоза Opisthorchis felineus паразитирует в гепатобилиарной системе рыбоядных млекопитающих и вызывает формирование очагов хронического воспаления в печени, неоплазию эпителия желчных протоков. Хронический описторхоз может стать причиной холангиокарциномы, рака желчевыводящих путей. Есть гипотеза, что механизм холангио-канцерогенеза связан с воздействием внеклеточных везикул O. felineus, эффект которых до сих пор не исследован. Целью исследования было изучить влияние секретируемого продукта взрослых особей O. felineus на показатели пролиферации и миграции иммортали-зированной клеточной линии холангиоцитов человека H69. Взрослых особей выделяли из желчных протоков печени хомяков Mesocricetus auratus, инфицированных O. felineus. Клетки H69 культивировали без прямого контакта с 1-6 взрослыми особями в обедненной среде. Скорость клеточной миграции оценивали при помощи теста на заживление раны. В качестве контроля были взяты опухолевые клетки печени человека HepG2. В отличие от HepG2, при бесконтактном сокуль-тивировании было показано увеличение скорости пролиферации клеток H69 от 4 до 17 раз, что сопровождалось также морфологическими изменениями клеток и увеличением скорости миграции в 2 раза, а также изменением типа миграции на индивидуальный характер. Внеклеточные везикулы взрослых особей опистор-хов были получены методом ультрафильтрации сред. Эффект везикул на пролиферацию и миграцию клеток H69 был аналогичен эффекту от со-культивирования со взрослыми особями. В отличие от холангиоцитов, влияние на клетки HepG2 оказалось несущественным. Таким образом, впервые показан выраженный специфический митогенный эффект внеклеточных везикул трематоды O. felineus на холангиоциты человека H69, а также на изменение их скорости и характера миграции. Показанные изменения пролиферации и миграции холангиоцитов in vitro могут отражать неоплазию холангиоцитов in vivo.