OBTAINING AND CHARACTERIZING THE CELL LINE OF HUMAN GASTRIC ADENOCARCINOMA

Abstract

Full Text

Из эксплантата опухоли методом «переживающей культуры» была получена линия клеток аденокарциномы желудка человека. Путем гистологического анализа было выявлено, что опухоль представляет собой недифференцированную аденокарциному желудка. При проведении им-муногистохимического исследования в клетках была показана ядерная экспрессия белка р53, что характерно для низкодифференцированых опухолей. Клетки демонстрируют высокий индекс пролиферативной активности - Ki67 до 85%. Культивирование клеток проводили в флаконах (Nunc), в питательной среде. DMEM (Thermo Fisher) c добавлением 10% сыворотки плода коровы (Gibco). Клетки обладают типичной для эпителиальной ткани морфологией, имеют очаговый характер роста, образуя плотные островки, которые впоследствии сливаются в монослой. Характеризуются высокой степенью вакуолизации. Проведя иммуногистохимический анализ клеточной линии был показан еще более высокий индекс пролиферативной активности- Ki67 до 95%. Клетки аденокарциномы желудка обычно отличаются высоким уровнем экспрессии цитокератинов 7 и 20. Клетки полученной культуры характеризуются отсутствием экспрессии этих белков, также они не экспрессируются и в клетках самой опухоли. Эта особенность указывает на соответствие клеток полученной культуры исходному материалу. Клеточные кластеры представлены полиморфными, атипичными, отдельными резко анаплазированными клетками с крупными ядрами, грубым глыбчатым хроматином, выступающими ядрышками, неравномерной, частью васкуляризированной цитоплазмой, единичными перстневидными клетками и наличием патологических митозов. Эти же черты присутствуют и в операционном материале. Была проведена оценка чувствительности клеточной культуры к действию противоопухолевых препаратов: 5-фторурацил (Veropharm, Россия), цисплатин (Teva, Израиль) лейковорин (Veropharm, Россия). В результате проведенных экспериментов было показано, что исследуемая линия клеток резистентна к этим препаратам. Таким образом, в результате работы была получена получена линия клеток недиффиренцированной аденокарциномы желудка человека кишечного типа.