Vzaimodeystvie retseptora urokinazy UPAR s retseptorom khemokinov FPRL reguliruet napravlenie rosta aksonov

Abstract

Full Text

Деградация внеклеточного матрикса (ВКМ) играет важную роль в регенерации органов и тканей, облегчая миграцию клеток и стимулируя ангиогенез и нейрогенез. Урокиназа (uPA) и урокиназный рецептор (uPAR), активируя внеклеточный протеолиз, высвобождают факторы роста и хемокины, задепонированные в ВКМ, и стимулируют миграцию клеток и рост сосудов и нервов по градиенту их концентрации. Обладая высокой подвижностью на мембране, GPI-заякоренный uPAR может латерально взаимодействовать со многими рецепторами, модулируя их функцию в зависимости от состава сигнальных комплексов. uPA при связывании с uPAR осуществляет про-теолиз uPAR с появлением растворимых форм рецептора suPAR. suPAR обладает свойствами хемокина: хемотакти-ческий эффект опосредован формилпептидными рецепторами FPRL1 и FPRL2 на базофилах, FPRL1 - на моноцитах и FPR - на CD34+ гематопоэтических стволовых клетках. Ранее нами обнаружены навигационные свойства uPAR в регуляции направленного роста аксонов: блокирование активности uPAR нарушало траекторию роста аксонов и увеличивало их ветвление. Мы предположили, что uPAR может регулировать траекторию роста аксонов за счет взаимодействия с хемокиновым рецептором FPRL1, который экспрессируется на аксонах. В исследовании с использованием эксплантной культуры спинального ганглия мыши (СГ) нами обнаружено, что повышенное содержание uPAR на мембране аксонов стимулирует рост нейритов даже в отсутствие урокиназы (СГ мышей, нокаутных по гену uPA, uPA-/-). Кроме того, введение растворимой формы suPAR мышам uPA-/- более, чем в три раза (p<0,05), стимулировало рост нейритов по градиенту концентрации по сравнению с контролем (альбумин). Изучая механизмы навигационных свойств uPAR, мы обнаружили, что в первичной культуре нейронов, выделенных из СГ, uPAR солоколизуется с FPRL1 не только в телах нейронов, но и на конусах растущих аксонов. Для подтверждения взаимодействия FPRL1 с suPAR мы провели ингибиторный анализ с использованием пертуссис-токсина, блокирующего внутриклеточную сигнализацию FPRL1. Чтобы исключить эффекты эндогенного uPAR использовали СГ мышей, нокаутных по гену uPAR (uPAR-/-). Оказалось, что блокирование FPRL1 в 2 раза снижает рост нейритов СГ мышей uPAR-/-, вызванный действием suPAR (р<0,05) по сравнению с контролем (альбумин). Таким образом, нами впервые показано, что suPAR обладает хемотактическими свойствами и опосредует направленный рост аксонов по механизму взаимодействия с хемокиновм рецептором FPRL1 на мембране конуса роста аксона.