Neyroprotektivnaya aktivnost' kombinatsii mozgovogo neyrotroficheskogo faktora i urokinaznogo aktivatora plazminogena pri gemorragicheskom insul'te: issledovanie proof-of-concept

Full Text

Острые нарушения мозгового кровообращения (ОНМК) по геморрагическому типу составляют около 1 5% всех инсультов, и ежегодно в России регистрируют более 40 тысяч случаев кровоизлияний в мозг. Эффективных терапевтических подходов для уменьшения области поражения и стимуляции восстановления поврежденного мозга при данной патологии на сегодняшний день не существует. Исходя из патогенеза развития заболевания, одними из перспективных препаратов для снижения объемов повреждения при геморрагическом инсульте могли бы быть нейротрофические факторы и/или активаторы плазми-ногена, которые способствовали бы лучшему выживанию поврежденных нейронов и восстановлению нервных связей. Ранее нами была создана генетическая конструкция, кодирующая мозговой нейротрофический фактор (BDNF) и урокиназный активатор плазминогена (uPA) человека, которая стимулировала восстановление нервных волокон на модели травмы периферического нерва. Схожесть патогенеза травмы нерва и ОНМК позволила предположить, что эта генетическая конструкция может быть эффективна и при лечении ОНМК. Однако, доставка генов BDNF и uPA, как в виде плазмиды, так и в составе лентивирусных частиц, в клетки в очаге геморрагического инсульта оказалась неэффективной. Для проверки гипотезы о принципиальной возможности BDNF и uPA стимулировать выживание и регенерацию нервной ткани в очаге ОНМК по геморрагическому типу (in vivo модель на крысах) была использована кондиционированная культуральная среда, собранная с клеток HEK293, экспрессирующих BDNF и uPA. Предварительные результаты исследования продемонстрировали способность такой среды снижать тяжесть повреждения головного мозга: в экспериментальной группе наблюдали менее тяжелые неврологические нарушения (Stroke-index McGrow) и меньшую площадь повреждения головного мозга (окраска срезов мозга по Нисслю). Таким образом, мы показали перспективность использования комбинации BDNF и uPA для восстановления мозга при ОНМК по геморрагическому типу на модели in vivo. Планируются дальнейшие углубленные исследования для изучения механизмов наблюдаемых эффектов и оптимизация методов доставки генотерапевтического препарата, кодирующего эти факторы, в ткани мозга. Исследование выполнено за счёт гранта Российского фонда фундаментальных исследований - проект № 18015-00535. В работе были использованы коллекции клеток и генетических конструкций, собранных и сохраняемых в рамках проекта «Ноев ковчег», и оборудования, приобретенного за счет средств Программы развития МГУ им. М.В. Ломоносова.

About the authors

Maksim Nikolaevich Karagyaur

Aleksandra Ivanovna Rostovtseva

Svetlana Aleksandrovna Litvinova

Stalik Stanislavovich Dzhauari

Email: stalik.djauari@yandex.ru

Vadim Yur'evich Balaban'yan

Ekaterina Vladimirovna Semina

Maksim Valer'evich Mnikhovich

Anastasiya Yur'evna Efimenko

Dmitriy Viktorovich Stambol'skiy

References

Supplementary files