THE EFFECT OF A WATER-SOLUBLE ANALOG OF VITAMINE E ON TUMOR CELL DEATH INDUCED BY DNA-DAMAGING CHEMOTHERAPEUTIC DRUGS

Abstract

Full Text

В противоопухолевой терапии широко применяются препараты, направленные на повреждение ДНК. В ряде случаев это сопровождается накоплением активных форм кислорода (АФК), что приводит к возникновению нарушений не только в опухолевых, но и в здоровых клетках. Воздействие таких препаратов на нормальные ткани ограничивает их применение в противоопухолевой терапии. Антиоксиданты способны детоксицировать АФК, что, с одной стороны, должно повышать устойчивость как опухолевых, так и неопухолевых клеток к химиотерапевтическим препаратам. С другой стороны, АФК играют ключевую роль в метастазировании опухолей, и использование антиоксидантов может позволить избежать этого процесса. Несмотря на большое количество исследований в данной области, вопрос об эффективности использования антиоксидантов в противоопухолевой терапии до сих пор остается дискуссионным. В данной работе исследовали влияние антиоксиданта тролокса (водорастворимого аналога витамина E) на гибель клеток легочной аденокарциномы (A549) и карциномы яичников (Caov4) как дикого типа, так и с нокаутом по каспазе-2. Для стимуляции гибели использовали препараты, повреждающие ДНК: цисплатин, этопозид и доксорубицин. Клетки инкубировали как в присутствии антиоксиданта тролокса, так и без него. Повреждение ДНК оценивали по накоплению фосфорилированной формы гистона H2AX, а также по аккумуляции транскрипционного фактора р53 в ответ на повреждение ДНК. О гибели клеток судили по процессингу (активации) каспазы-2, -8, -3, а также по расщеплению поли(АДФ-рибоза)-полимеразы (PARP), субстрата каспазы-3. Оценку проводили с использованием электрофореза в полиакриламидном геле с последующим переносом белков на нитроцеллюлозную мембрану и обработкой соответствующими антителами. Результаты показали, что тролокс не оказывает существенного влияния на гибель используемых в работе клеток. Учитывая более высокое содержание АФК в клетках опухоли, можно предположить, что использование тролок-са позволит снизить цитотоксичность ДНК-повреждающих препаратов для клеток нормальных тканей, не затрагивая их способность вызывать гибель опухолевых.