Izuchenie effektivnosti kletochnooposredovannoy gennoy terapii v sochetanii s epidural'noy elektrostimulyatsiey na morfo-funktsional'noe vosstanovlenie spinnogo mozga mini-svin'i s kontuzionnoy travmoy



Cite item

Full Text

Abstract

Full Text

На сегодняшний день эффективных методов терапии травмы спинного мозга (ТСМ) не существует. Поиск новых способов лечения ТСМ и их испытания на крупных лабораторных животных являются одной из актуальных проблем, как неврологии, так и регенеративной медицины. В данной работе изучена эффективность клеточноопосредованной генной терапии (ГТ) в сочетании с эпи-дуральной электростимуляцией (ЭС) у мини-свиней после моделирования ТСМ. Подопытным мини-свиньям с ТСМ на уровне Th8 (n=2) через 4 ч после операции интратекально вводили генно-модифицированные мононуклеарные клетки крови пуповины человека, одновременно продуцирующие рекомбинантные сосудистый эндотелиальный фактор роста, глиальный нейротрофический фактор и нейрональную молекулу клеточной адгезии. ЭС начинали через 2 недели после нанесения нейротравмы и проводили выше места повреждения на уровне С5 для стимулирования роста аксонов через эпицентр травмы и ниже - на уровне L2 для возбуждения генераторов центрального паттерна. Для ЭС использовали электростимулятор Digitimer DS7A, сила тока варьировала от 7 мА до 15 мА, частота 25-30 Hz. Контрольным животным после моделирования ТСМ (n=2) интратекально вводили физиологический раствор. Через 2 месяца после моделирования ТСМ анализ кинематики суставов во время ЭС выявил, что объем движений в голеностопном суставе подопытных минисвиней приблизился к значениям интактных животных. Поведенческий тест, оценивающий состояние минисвиней после ТСМ грудного отдела, также выявил лучший показатель восстановления двигательной функции у подопытных животных. Электрофизиологическое исследование m.soleus, показало, что у контрольных животных моторный (М) ответ имел несколько фаз, а рефлекторный (Н) ответ отсутствовал. В терапевтической группе М- и Н-ответы имели стандартную форму. Морфометрический анализ объема патологических полостей в сером веществе спинного мозга выявил большую сохранность ткани у подопытных мини-свиней по сравнению с контрольными. Иммунофлуоресцентный анализ выявил меньшее количество Caspase3+-клеток и больший уровень экспрессии Hsp27, синаптофизина и PSD95 у подопытных мини-свиней. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о положительном эффекте ЭС в сочетании с ГТ на мор-фо-функциональное восстановление спинного мозга у мини-свиней с ТСМ и могут явиться основой для разработки клинического протокола лечения ТСМ у человека с помощью комбинированной электро- и генной терапии.
×

References

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2019 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: