POLYLACTIDE FILM ASSOCIATED WITH ALLOGENOUS FIBROBLASTS CHANGES REGENERATIVE HISTOGENESIS OF ISCHEMIZED CUTANEUS WOUNDS

Abstract

Full Text

Тканеинженерная кожа с механическими и биологическими свойствами, соответствующими нативной ткани, становится ценным средством для лечения незаживающих хронических ран [Ю.А. Швед и др., 2006]. Однако работы о морфологических преобразованиях в тканях таких ран после трансплантации полилактидной пленки с аллогенными фибробластами редки и не раскрывают проблему в разные сроки раневого процесса. Цель исследования. Оценить коллагенообразование, ангиогенез и содержание Т-лимфоцитов в биоптатах на 12-е сутки после закрытия модельной ишемизированной кожной раны полилактидной пленкой ассоциированной с дермальными фибробластами. Материал и методы. Исследование выполнено на 14 белых мышах линии С57/В1. Животные были разделены на контрольную и экспериментальную группы. Кожную рану в лопаточной области (Барановский Ю.Г. с соавт., 2016) в экспериментальной группе накрывали пленкой толщиной 100 мкм из поли%%-лактида с аллогенными дермальными фибробластами, в контрольной группе лечение не проводилось. На 12 сутки рубец заливали в парафин, окрашивали гематоксилином и эозином и по Вейгерту-Ван-Гизону. Толщину эпидермиса, количество микрососудов в срезах, площадь коллагеновых волокон и микрососудов в дерме рубцов измеряли с помощью программы "ImageJ” при увеличении объектива 40 и окуляра 10 по 50 замеров в каждой группе. Присутствие Т-лимфоцитов выявляли первичными антителами к CD3 [SP7] фирмы Abcam (ab1 6669). Вычисляли индекс CD3+ клеток. Статистическую обработку цифровых данных проводили с использованием аналитического пакета приложения STATISTICA Enterprise (StatSoft Inc., США). Результаты. У мышей экспериментальной группы эпителизация раны и отпадение силиконового кольца зафиксировано на 31,41% раньше, чем в контроле. Толщина эпидермиса на 2,63% меньше, чем в группе контроля, но он был более дифференцированными и образовывал выросты в подлежащую грануляционную ткань, являющимися закладкой шерстинок. В грануляционной ткани рубца коллагеновые волокна приобрели упорядоченное расположение и площадь, занятая коллагеновыми волокнами, больше на 16,2% по сравнению с контрольной группой. Площадь, занимаемая кровеносными сосудами сократилась на 30,43% по сравнению с контролем, что свидетельствует об уменьшении кровенаполнения и начавшихся процессах фиброзирования. Лейкоцитарная инфильтрация выражена слабо, что можно считать признаком преодоления воспалительной фазы раневого процесса. Обнаружено отсутствие статистически достоверного различия между контрольной и экспериментальной группами в содержании клеток с основным маркером Т-лимфоцитов CD3, принимающих участие в реакциях отторжения. Заключение. Биодеградирующая пленка из поли-L-L-лактида с культивированными на ней аллогенными дермальными фибробластами к 12-м суткам репарации существенно улучшает микроскопическую картину раневого процесса и макроскопические признаки заживления ишемизированной раны кожи, а также не вызывает реакцию отторжения.