Vozdeystvie polyarizuyushchikh faktorov na ekspressionnyy profil' i immunomoduliruyushchie svoystva mezenkhimal'nykh stromal'nykh kletok zhirovoy tkani

Abstract

Full Text

Применение мезенхимальных стромальных клеток жировой ткани (МСКЖТ) для восстановления функции поврежденных органов находит широкое применение в регенеративной медицине, однако существенно затруднено гетерогенностью их состава, значимо снижающей их жизнеспособность и эффективность их паракринного воздействия на пораженную ткань. Один из современных подходов к преодолению этого препятствия заключается в поляризации клеточных субпопуляций в конкретный фенотип под воздействием цитокинов и других факторов, активирующих рецепторы и передачу сигнала в клетки. В нашем исследовании мы осуществили поляризацию МСКЖТ факторами, влияющими на воспалительный сигналинг и функциональные свойства клеток, с последующей верификацией их экспрессионного профиля и способности воздействовать на поляризацию макрофагов периферической крови. Оценка, проведенная методом ПЦР в реальном времени, показала, что клетки, обработанные бактериальным липополисахаридом (ЛПС), интерлейкином-17, фактором некроза опухолей-а (ФНО-а), экспрессируют преимущественно провоспалительные факторы и цитокины, а после обработки полиинозино-вой-полицитидиновой кислотой, интерлейкином-4 (ИЛ-4) и а-фетопротеином - противовоспалительные факторы. Макрофаги крови, поляризовали в М1-фенотип в присутствии ЛПС и ИНФ-y и в М2 -в присутствии ИЛ-4, оценку эффективности поляризации проводили методом проточной цитофлуориметрии по экспрессии маркера М1 фенотипа- CD80, и М2-фенотипа -CD206. Далее мы оценили возможность паракринного воздействия МСКЖТ на поляризацию интактных макрофагов и показали, что кондиционированные среды мезенхимальных стромальных клеток, прединкубированных в присутствии ИЛ-4, вызывают усиление экспрессии CD206, аналогичное наблюдаемому в М2 макрофагах. Среды МСКЖТ, поляризованных в присутствии ЛПС или ФНО-а, повышали экспрессию в макрофагах антигена CD80, аналогичное наблюдаемому в М1 макрофагах. В остальных случаях выраженного паракринного влияния МСКЖТ на поляризацию макрофагов выявлено не было. Таким образом, проведенное нами исследование показало, что поляризация МСКЖТ по провоспалительному или противовоспалительному пути позволяет получить клеточные субпопуляции, оказывающие разнонаправленное модулирующее воздействие на поляризацию макрофагов.