GENERATION OF TUMOR-SPECIFIC T-LYMPHOCYTES WITH ONCOLYTIC REOVIRUS P-92 IN VITRO

Abstract

Full Text

Онколитические вирусы (ОВ) являются перспективными ингибиторами опухолевого роста, оказывая прямой лизис опухолевых клеток и опосредованно вызывая иммунный ответ. Нарушение распознавания антигенов опухоли клетками иммунной системы при онкологических патологиях является критичным, поэтому в данной работе мы исследовали возможность повышения эффективности генерации опухолеспецифических Т-лимфоцитов путем совместного культивирования с онколитическим реовирусом Р-92. Из мононуклеарных клеток периферической крови здоровых доноров (протокол этического комитета ФГБУ «РНИОИ» Минздрава России № 33/1 от 29.11.2018г.) генерировали зрелые дендритные клетки (ДК) (внесение на 1-, 3- и 5-ые сут. культивирования 20 нг/ мл IL-4 и 72 нг/мг GM-CSF), с использованием различной антигенной нагрузки: а) лизат культуры клеток HeLa; б) ре-овирус Р-92 совместно с лизатом клеток HeLa, подробнее в [1]; в) реовирус Р-92. Далее зрелые ДК в течение 5 дней культивировали с аутологичными лимфоцитами, после чего проверяли опухолеспецифическое действие полученных лимфоцитов на культуре клеток HeLa. Дифференцировка ДК в присутствии реовируса Р-92 способствовала увеличению количества зрелых Дк. Интересно, что в противоположность образцам с добав-леннным реовирусом Р-92, лимфоциты, активированные ДК, нагруженными только опухолевыми антигенами (антигенами HeLa) не показали активного цитолитического действия на культуре HeLa, наблюдали лишь цитостатический эффект. Таким образом, культивирование клеток HeLa с реовирусом Р-92 позволяет получить антиген для нагрузки ДК, позволяющий увеличить эффективность генерации опухольспецифических лимфоцитов, на основе которого может быть получен новый улучшенный продукт для клеточной иммунотерапии опухолей.