CHARACTERIZATION OF LIMBAL STEM CELLS IN VITRO

Abstract

Full Text

Существует немало причин, которые приводят к потере прозрачности роговицы (её воспалению, васкуляризации и возникновению бельма). Комплекс данных симптомов называется лимбальной недостаточностью (ЛН). Восстановление эпителия роговицы происходит за счёт пула лимбальных стволовых клеток (ЛСК), расположенных в складках лимба, который является границей между конъюнктивой и роговицей. Полная или частичная утрата функциональности ЛСК ведёт к развитию ЛН. Существующие консервативные методы лечения ЛН часто не помогают добиться полного восстановления функции роговицы. Таким образом одной из актуальных задач регенеративной офтальмологии на данный момент является разработка биомедицинского клеточного продукта (бМкП) на основе ЛСК. При клиническом использовании БМКП требуется идентификация используемой клеточной линии. Таким образом, основным вопросом этой работы стало выделение и исследование культуры ЛСК кролика. Полученная популяция изначально имела смешанный фенотип - была представлена клетками как эпителиального, так и мезенхимного типов, но в ходе культивирования постепенно приобрела гомогенный состав - все клетки к шестому пассажу имели мезенхимный фенотип. Мы показали, что выделенная культура ЛСК способна к дифференцировке в остеогенном и хондрогенном и эпителиальном направлениях. Было показано наличие экспрессии стволовых маркеров в культуре ЛСК. Однако несмотря на мезенхимный фенотип - ЛСК сохраняли и эпителиальные маркеры - цитокератины. Полученные данные в совокупности позволяют предположить, что культура ЛСК в ходе пассажей претерпевает изменения, описанные в литературе как частичный эпителиальномезенхимальный переход (ЭМП).