Stvolovye kletki slizistoy nizhney guby v tkanevoy inzhenerii rogovitsy glaza

Abstract

Full Text

В современной трансплантологии существует острый дефицит донорского материала, в связи с чем активно развиваются альтернативные подходы по созданию биоинженерных конструкций (БИК), обладающих потенциальной возможностью заменить донорский материал. Наиболее перспективными в этой области являются подходы по 3D-биопринтингу тканей и органов, однако их применение ограничено несовершенством методик создания тканевых конструктов, а также высокой стоимостью технологий. Поэтому в данный момент самым оптимальным методом является использование БИК, сконструированных на основе различных стволовых клеток и клеточного носителя. Из большого количества исследованных стволовых клеток одними из перспективных являются стволовые клетки слизистой нижней губы (СКСНГ). Т.к., во-первых, забор биоптата слизистой является нетрудоемким и не сопряжен с рисками для здоровья пациента, во-вторых, выделяемые из нее клетки являются аутологичными для реципиента. Настоящая работа посвящена характеристике (анализу кариотипа, а также пролиферативного и дифференцированного потенциала) СКСНГ и оценке возможности создания на их основе БИК для применения в регенеративной медицине. Характеристику проводили на клетках, выделенных из слизистой нижней губы кролика и человека. Кроме того, СКСНГ кролика использовали для конструирования БИК, состоящих из данных клеток и децеллюляризован-ной человеческой амниотической мембраны в качестве клеточного носителя. Терапевтический потенциал сконструированных БИК оценивали при лечении лимбальной недостаточности в эксперименте in vivo на кроликах. В работе получены данные, основываясь на которых, можно сделать выводы о высокой пролиферативной активности СКСНГ и их способности дифференцироваться в различных направлениях. Кроме того, было установлено, что СКСНГ имеют стабильный набор хромосом с низким процентом хромосомных перестроек. Результаты иммуноцитохимического анализа продемонстрировали стволовую природу исследованных клеток (экспрессия набора таких маркеров, как: ABCB5, ABCG2, ALDH3A1, NGF-R(p75), p63a), наравне с этим была выявлена экспрессия эпителиальных маркеров (CK3/12, CK14, CK15). Трансплантация БИК, созданных на основе СКСНГ кролика и амниотической мембраны, обеспечила восстановление «нормальной» эпителизации роговицы, а также способствовала сохранению ее прозрачности. Полученные данные позволяют судить о потенциальной возможности использования данного типа клеток в тканевой инженерии, в частности для восстановления эктодермальных тканей.